[发明专利]一种填充柱用于纯化血清样品中的多种多溴联苯醚及柱子再活化的方法

权利要求书

1.一种用于纯化血清样品中的多溴联苯醚的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)样品前处理：取血清样品至离心管中，加入回收率指示物、6mol/L HCl溶液和异丙醇，震荡除去蛋白；再加入甲基叔丁基醚和饱和氯化钾盐水，剧烈震荡15min后离心，静置分层；分离其中的有机相，用甲基叔丁基醚萃取两次，合并萃取后的有机相，通过无水硫酸钠脱水干燥，并在旋转蒸发仪上浓缩，并用氮气干燥，得到待分离样品；按体积比，所述血清：HCl溶液：异丙醇：甲基叔丁基醚：饱和氯化钾盐水：甲基叔丁基醚＝1:2:6:10:5:10；

2)填充柱活化：用正己烷淋洗填充柱，抽干填充柱待用；所述填充柱下层为硅胶，上层为无水硫酸钠，硅胶和无水硫酸钠的填充高度比为3.5:1，不同填充材料之间通过硅胶垫片分隔；

3)上样：将待分离样品溶解于正己烷中，加入填充柱中，弃去流出液；

4)淋洗：用体积比为二氯甲烷：正己烷＝3:7的淋洗液进行淋洗；

5)洗脱：加入体积比为正己烷：二氯甲烷＝1:1的洗脱液进行洗脱，并收集洗脱液；

6)浓缩：将洗脱液浓缩，并通过氮气体吹干，得到残留物，即纯化后的多溴联苯醚样品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中所述回收率指示物为BDE-77、BDE-128和BDE-181。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的填充柱为玻璃材质，内径为1cm，高10cm；使用前经过铬酸-浓硫酸洗液浸泡6～12小时后，去离子洗涤，鼓风干燥箱烘干，再300～500℃烧3～6小时，冷却，备用。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的硅胶为氧化性硅胶；为100～200目的硅胶和浓硫酸按质量比为2:1混匀制备得到。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述硅胶使用前先在索氏提取仪中用甲醇蒸馏12～48小时，再用正己烷蒸馏12～48小时后，再600℃烧6～12小时，冷却，置于干燥器中待用。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中的上样过程具体为：将待分离样品溶解于1mL正己烷中，转入填充柱子，用1mL体积比为二氯甲烷：正己烷＝3:7的淋洗液进行淋洗，收集淋洗液，分多次重新转移至填充柱，淋洗重上柱过程至少3次。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无水硫酸钠或氯化钾使用前直接在600℃马弗炉烧3～6小时，冷却，置于干燥器待用。

8.作为本发明的优选实施方式，所述步骤4)中的淋洗过程为：分别用1mL的淋洗液淋洗3次，收集每次流出的液体重新上柱；再分别用3mL的淋洗液淋洗2次，最后用4mL的淋洗液再淋洗一次。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括回收填充材料的过程，将无水乙醇、正己烷溶液加入洗脱后的填充柱，洗涤3次，分别收集上层的硫酸钠和下层硅胶，至于表面皿中，用铝箔纸封盖，于马弗炉600℃烧3～6小时，即获得再生的无水硫酸钠和硅胶填料。

10.根据权利要求1～9任一项所述方法在检测血清中多溴联苯醚的应用。