[发明专利]一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法

权利要求书

1.一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1)对粪肠球菌菌苔进行预处理；

2)从步骤1)中挑选优势菌落并进行多次极限温度液体培养及平板菌落筛选，即得到耐高温粪肠球菌；

步骤2)中，所述的极限温度为49-51℃。

2.根据权利要求1所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，步骤1)中，预处理过程为：

1-1)从菌种斜面上挑选菌苔并接种于液体培养基中，之后在49-51℃静置厌氧培养45-50h；

1-2)将液体培养基划线接种于固体培养基上，之后在35-40℃厌氧培养45-50h。

3.根据权利要求2所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，步骤2)中，极限温度培养过程为：将优势菌落接种于液体培养基中，之后在49-51℃静置厌氧培养45-50h。

4.根据权利要求3所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，步骤2)中，平板菌落筛选过程为：将液体培养基划线接种于固体培养基上，之后在35-40℃厌氧培养45-50h。

5.根据权利要求4所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，所述的液体培养基及固体培养基均为改良MRS培养基。

6.根据权利要求5所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，所述的液体培养基包括以下组分：蛋白胨9-11g/L、牛肉膏9-11g/L、酵母浸粉4-6g/L、乙酸钠4-6g/L、柠檬酸二胺1.5-2.5g/L、磷酸氢二钾1.5-2.5g/L、吐温80 0.5-1.5g/L、硫酸镁0.3-0.8g/L及硫酸锰0.2-0.3g/L。

7.根据权利要求6所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，所述的液体培养基的pH值为7-7.5。

8.根据权利要求5所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，所述的固体培养基包括以下组分：蛋白胨9-11g/L、牛肉膏9-11g/L、酵母浸粉4-6g/L、乙酸钠4-6g/L、柠檬酸二胺1.5-2.5g/L、磷酸氢二钾1.5-2.5g/L、吐温80 0.5-1.5g/L、硫酸镁0.3-0.8g/L、硫酸锰0.2-0.3g/L及琼脂15-20g/L。

9.根据权利要求1所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，步骤2)中，进行极限温度液体培养及平板菌落筛选的次数为3-5次。

10.根据权利要求1所述的一种耐高温粪肠球菌的筛选与驯化方法，其特征在于，步骤2)中，所述的极限温度为50℃。