[发明专利]新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测试剂盒及其制备方法，涉及生物医药领域，包括酶结合物、样品稀释液、阴性对照液、阳性对照液、底物A液、底物B液、浓缩洗涤液、终止液和预包被新冠病毒抗原的包被板，酶结合物为用酶标稀释液按工作浓度配制的羊抗人IgG‑HRP工作液,通过抗原抗体的免疫特异性反应进行检测，以定性判定测试样本中是否存在新型冠状病毒IgG抗体，具有高特异性和抗干扰性强的特点，同时本申请结构简单、检测成本低、准确性好，本发明一种新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测方法，通过抗原抗体的免疫特异性反应进行检测，具有高特异性、准确性强的特点，步骤简便，设计合理，适合推广。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测试剂盒及其检测方法，具体地说是一种利用间接法原理的酶联免疫法实现定性检测血清或血浆样本中的新型冠状病毒IgG抗体。

背景技术

2019年12月以来，出现了新型冠状病毒（2019‑nCoV）疫情。其常见体征有发热、乏力、干咳、逐渐出现呼吸困难，而部分患者病症状轻微，甚至存在无临床症状的无症状患者。具备人传人的特点，一般潜伏期1‑14天，且潜伏期具有传染性，而无症状感染者也可能成为传染源，其主要通过呼吸道飞沫和密切接触传染传播，人群普遍易感。

疫情发展至今，仍有不少疑似病例因为检测效率不足等原因尚未确诊，但现有检测试剂存在灵敏度低、抗干扰能力弱的缺点，时常出现试剂诊断假阴性、假阳性的困扰，这不仅困扰着诊断环节，也存在于康复环节，没有精准的诊断难以有精准的治疗，因此如何精准地批量筛查疑似病例，供临床医生准确判断是否为新型冠状病毒肺炎，以便于快速隔离免于传染给更多的人，是亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵敏度高、特异性强、准确性好的新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测试剂盒。

本发明的另一个目的是提供一种新型冠状病毒IgG抗体酶联免疫检测试剂盒的测试方法。

本发明提供技术方案如下：包括酶结合物、样品稀释液、阴性对照液、阳性对照液、底物A液、底物B液、终止液、浓缩洗涤液和预包被新冠病毒抗原的包被板；

所述酶结合物为用酶标稀释液按工作浓度配制的羊抗人IgG-HRP工作液；

所述预包被新冠病毒抗原的包被板的制备方法为：

（1）包被：将新冠病毒抗原用包被缓冲液稀释后，按100μL/孔包被到包被板的孔内，在2～8℃吸附21～24小时；

（2）封闭：弃去包被液，用10mmol/L的浓缩洗涤液按300μL/孔洗板，再用封闭液按150μL/孔在2～8℃封闭16～18小时；

（3）干燥及保存：弃去封闭液，经干燥处理后密封，置2～8℃保存。

作为本发明的进一步改进，所述新冠病毒抗原为基因工程重组表达的新冠病毒S2蛋白。

作为本发明的进一步改进，所述包被缓冲液为含0.02wt%叠氮钠的0.05mol/L、pH9.6碳酸盐缓冲液，按1:500～1:1000的体积比例稀释新冠病毒抗原。

作为本发明的进一步改进，所述封闭液为含5wt%蔗糖、2wt%液体明胶、0.25wt%干酪素钠、0.1wt%ProClin300的0.07mol/L硼酸-硼砂缓冲液。

作为本发明的进一步改进，所述样品稀释液为含20wt%山羊血清、0.2wt%干酪素钠、5wt%PEG6000、4wt%蔗糖、0.1wt%ProClin300的10mmol/L、pH7.4PBS。