[发明专利]一种纤维单胞菌及其制备微生物絮凝剂的方法和应用有效
申请号: | 202010221639.8 | 申请日: | 2020-03-26 |
公开(公告)号: | CN111394279B | 公开(公告)日: | 2021-11-19 |
发明(设计)人: | 徐健峰;章沙沙;孙晓丽;柳增善;卢士英;郭微 | 申请(专利权)人: | 盘锦检验检测中心;吉林大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/06;C02F3/34;C12R1/01;C02F103/20 |
代理公司: | 苏州和氏璧知识产权代理事务所(普通合伙) 32390 | 代理人: | 李晓星 |
地址: | 124010 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纤维 单胞菌 及其 制备 微生物 絮凝 方法 应用 | ||
1.一种纤维单胞菌,其特征在于,所述纤维单胞菌的菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.1.17732。
2.一种制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一、培养纤维单胞菌,纤维单胞菌的菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.1.17732;
步骤二、将纤维单胞菌发酵培养,然后破碎纤维单胞菌的细胞壁得到的破碎液即微生物絮凝剂。
3.如权利要求2所述的制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,所述步骤一包括如下步骤:
1.1)将纤维单胞菌平板菌落接种到液体种子培养基中培养得到菌株种子液;
1.2)菌株种子液接种到种子发酵培养基中培养发酵,得到发酵液。
4.如权利要求3所述的制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,所述液体种子培养基为LB液体培养基,LB液体培养基包括酵母粉5重量份蛋白胨10重量份,NaCl 5重量份,蒸馏水1000重量份,pH7.0-8.0,并经121℃灭菌30min得到;
所述种子发酵培养基包括CMC-Na 10重量份,KH2PO4 1重量份,K2HPO4 1重量份,MgSO4 0.2重量份,(NH4)2SO4 3重量份,NaCl 1重量份,蒸馏水1000重量份,pH7.0-8.0,并经121℃灭菌30min得到。
5.如权利要求4所述的制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,菌株种子液制备方法如下:将纤维单胞菌平板菌落接种到液体种子培养基中, 36-37℃,155r/min震荡培养24h,得到菌株种子液;
菌株种子液接种到种子发酵培养基中36-37℃发酵48h制得发酵液,其中菌株种子液与发酵培养基的体积比为2:98。
6.如权利要求5所述的制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,所述步骤二中,发酵液在8000r/min下离心5min,弃去上清液,保留菌体沉淀,沉淀用0.1M PBS溶解清洗两次,8000r/min离心5min,再将沉淀菌体用PBS溶液重悬,重悬时菌体与PBS溶液的质量体积比为0.1g/mlpH值为 7.4,超声破碎处理后得到的破碎液即为微生物絮凝剂。
7.如权利要求2所述的制备微生物絮凝剂的方法,其特征在于,所述纤维单胞菌的16SrRNA含有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
8.一种权利要求2-7任一所述制备微生物絮凝剂的方法制得的微生物絮凝剂,其特征在于,所述微生物絮凝剂用于处理家畜养殖场废水。
9.如权利要求8所述的制备微生物絮凝剂的方法制得的微生物絮凝剂,其特征在于,所述家畜养殖场废水为养猪场废水。
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