[发明专利]一株轮纹镰刀菌及其应用

说明书

本发明公开了一株轮纹镰刀菌及其应用。本发明的轮纹镰刀菌FCPC‑L01菌株(Fusarium concentricum FCPC‑L01)，其保藏编号为：GDMCC No：60971；其最佳液体发酵条件为：蔗糖马铃薯培养液PS，发酵培养的温度为25℃‑28℃，初始pH为4‑6，摇床转速180‑210rpm；将发酵液转移至大米上进行固体发酵，产出的分生孢子对杉梢小卷蛾幼虫具有较强的毒力。本发明提供了一种防治杉木重大害虫杉梢小卷蛾的生防菌株及发酵方法，相比较于现阶段针对杉梢小卷蛾的化学防治方法，更加绿色环保、无毒安全，具有重要的市场应用和推广价值。

技术领域

本发明属于利用虫生真菌防治林业及农业害虫技术领域，具体涉及一株轮纹镰刀菌及其应用。

背景技术

杉木为中国特有种，其生长快、易成活、材性好，是南方诸省主要的速生用材树种。杉木种子园是提供优良种源的基地。据统计，1987年我省杉木良种基地面积超过4000亩，对杉木良种化及速生丰产起到了积极推动作用。杉木病虫的爆发危害是影响种子产量和播种品质的重要因素之一，因此，病虫害防治是杉木种子园经营管理的重要内容之一。杉梢小卷蛾Polychrosis cunninhamiacola是隶属于鳞翅目卷蛾科的一种昆虫，近年来在粤北地区爆发成灾。该虫分布于广东、广西、福建、江西、浙江、贵州、四川等主要杉木产区，以幼虫蛀入杉木嫩梢顶芽，造成多头、无头或偏冠等现象，并可使干形扭曲，严重影响树木生长和材质。目前主要是利用化学农药对杉梢小卷蛾进行防治。但是由于杉木种植面积较大，大量使用高毒化学农药不仅污染和破坏生态环境，影响林产品安全，而且杀伤天敌、使害虫容易产生抗药性。随着无公害农林产品和向往优美生态环境的社会需求日益增长，国家越来越强调绿色协调可持续的经济发展理念，更加重视减少化学农药的使用，大力提倡生物农药的发展。

虫生真菌是一类能够寄生并杀死昆虫的真菌，在害虫综合治理、天敌保护和生态平衡中等方面发挥重要作用。虫生真菌通过孢子侵入昆虫体壁，随后着生大量菌丝吸取寄主营养、破坏寄主组织使昆虫死亡。

因此，亟待开发防治杉梢小卷蛾的生防菌和方法。

发明内容

本发明的目的是针对目前杉木种植面积扩大，杉梢小卷蛾危害日益猖獗，而现有技术中针对杉梢小卷蛾的防治困难，化学农药防治过程中人工施药困难，飞机喷药成本较大，而且存在污染破坏生态环境的问题，提供一株可持续自然控制该害虫的优良菌株轮纹镰刀菌及其应用。

本发明的第一个目的是提供一株轮纹镰刀菌，其保藏编号为：GDMCC No：60971。

本发明的优良菌株分离自野外杉梢小卷蛾僵虫虫体上，经室内分离以及形态和分子鉴定确定为轮纹镰刀菌，命名为轮纹镰刀菌FCPC-L01(Fusarium concentricum FCPC-L01)菌株。

本发明的轮纹镰刀菌FCPC-L01(Fusarium concentricum FCPC-L01)的菌学特性如下：

形态特征：该菌株的分生孢子有大型孢子和小型孢子两种形态，小型分生孢子的数量较多，无分隔，呈卵圆形。大型分生孢子数量较少，呈月牙形，稍弯曲，含1-5个分隔，大多数为3分隔，大小约为2×17um。根据以上形态学观察结果，初步判定该菌株属于镰刀菌属。

分子生物学特征：用TEF-1α基因序列比对方法进行鉴定。使用引物对F：5′-ATGGGTAAGGAGGACAAGAC-3′和R：5′-GGAAGTACCAGTGATCATGTT-3′对该菌基因组DNA进行PCR扩增TEF-1α基因部分序列片段。将扩增的片段进行测序，测序结果显示该片段序列为678bp，其序列如SEQ ID NO.1所示。

经过Mega5三种不同方法构建系统发育树，该菌株始终和轮纹镰刀菌聚为一枝，且得分较高，结合上述形态观察结果，确定将该菌株是轮纹镰刀菌Fusarium concentricum，并编号为FCPC-L01菌株。