[发明专利]一种制备抗丙型肝炎病毒活性化合物雷斯吲哚甲的海洋青霉菌

说明书

本发明属于医药生物领域，涉及从海洋来源的雷斯青霉菌获得新结构化合物雷斯吲哚甲(英文名称：raistrickindole A)制备方法；本发明还涉及所述化合物抗丙型肝炎病毒(HCV)感染的应用，以及制备抗丙型肝炎病毒活性化合物雷斯吲哚甲的海洋青霉菌。

技术领域：

本发明属于医药生物领域，涉及从海洋来源的雷斯青霉菌获得新结构化合物雷斯吲哚甲(英文名称：raistrickindole A)制备方法；本发明还涉及所述化合物抗丙型肝炎病毒(HCV)感染的应用。

背景技术：

丙型肝炎病毒(HCV)对人类健康构成了严重的威胁，据估计全球约有1.7亿HCV慢性感染者[Lauer,et al.新英格兰医学杂志，2001,345,41-51.]。全球每年死于HCV感染的人数超过39万[世界卫生组织，全球肝炎报告，2017]。慢性丙肝患者有很高的风险发展为致命性肝病并发症，包括肝硬化和肝癌。其中，肝硬化的发病率达到20％，而在肝硬化患者中，每年肝癌的发病率达到4％-5％。近年来，随着索非布韦等核苷/酸抑制剂的上市，丙肝治疗取得了重大进展。然而，由于治疗费用较高，耐药以及较窄的病毒特异性，丙肝治疗仍充满挑战，迫切需要研发具有新作用机制的抗HCV药物。

海洋微生物是药物先导化合物发现的重要来源。本发明从一株来源于海洋的雷斯青霉菌IMB17-034(Penicillium raistrickii)的发酵液中，分离获得一个新结构的吲哚二酮哌嗪生物碱，命名为雷斯吲哚甲(英文名称：raistrickindole A，式I)。涉及式I所示化合物的化学结构、制备方法及抗丙型肝炎病毒应用，迄今为止，尚未见有关报道。

发明内容：

本发明目的之一是，提供一株产生雷斯吲哚甲(raistrickindole A)的产生菌。

该菌株为一种海洋真菌菌株，具体为雷斯青霉菌，优选为雷斯青霉菌IMB17-034，系分离自三亚红树林采集的海泥样品，该菌株于2019年02月22日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，建议的分类命名：雷斯青霉Penicillium raistrickii，参据的生物材料：IMB17-034，保藏编号：CGMCC No.17185。

本发明目的之二是，提供一种新结构的化合物，雷斯吲哚甲。

本发明从海洋真菌雷斯青霉菌IMB17-034(Penicillium raistrickii)的发酵产物中发现的新化合物雷斯吲哚甲(raistrickindole A)，其结构如式I所示。

该化合物的分子式C₂₀H₁₉N₃O₄，分子量365。

本发明目的之三是，提供化合物雷斯吲哚甲的制备方法。

本发明所述的化合物雷斯吲哚甲的制备方法，包括以下步骤：

(1)将活化的保藏编号为CGMCC No.17185的雷斯青霉菌IMB17-034接种于配方为马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)的发酵培养基中，制作种子液，随后，将种子液转接于大米固体发酵培养基中，培养；

(2)收集菌株固体发酵产物，加入有机溶剂超声提取，得到提取物；

(3)将提取物经C18反相闪式柱色谱分离，用10％、30％、50％、70％、100％浓度的有机溶剂梯度洗脱，得到5个洗脱组分(F1-F5)，取50％洗脱组分经凝胶柱分离，然后经HPLC制备得到含有式I所示化合物。

优选的，本发明所述的化合物雷斯吲哚甲的制备方法，包括以下步骤：