[发明专利]一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用

说明书

本发明公开了一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用，BpNAC100基因在白桦响应盐胁迫上的应用，BpNAC100基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，氨基酸的序列表如序列表中SEQ ID NO:2所示；本发明利用农杆菌介导法分别在白桦中过表达和抑制表达BpNAC100基因及其启动子，获得了proBpNAC100::Luc转基因白桦植株和BpNAC100::GFP、BpNAC100‑RNAi转基因白桦植株，得出BpNAC100基因的启动子在白桦不同组织部位具有空间表达特异性，BpNAC100::GFP转基因白桦植株具有抗盐害能力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用。

背景技术

NAC(NAM，ATAF1，ATAF2和CUC2)转录因子是植物特有的一类转录因子，广泛存在于多种陆生植物中并具有多种生物功能，在拟南芥((Arabidopsis thaliana)和水稻(Oryzasative)中分别有117条和151条NAC基因，其他物种中也有许多NAC基因(Pereira-Santana et al.，2015)。NAC蛋白的N端区域高度保守，有150-160个氨基酸的NAC结构域，C端区域是具有高度多样性的转录调控区(TRR)。NAC转录因子有广泛的生物功能，包括顶端分生组织形成和器官分化，细胞分裂，激素信号转导，叶片衰老，开花，侧生根形成，应激反应和木质部形成等。NAC转录因子也在植物胁迫响应时在复杂的信号网络中起着重要作用。

白桦(Betulaplatyphulla)是我国重要的阔叶用材树种之一，白桦生长迅速、易于繁殖和栽培，用途广泛，也具有一定的药用和观赏价值。由于NAC转录因子是具有多种生物功能的植物特异转录因子，其在白桦中的功能和分子机制研究甚少，研究NAC100基因在白桦体内的功能具有重要意义。因此，本发明提出一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用，以解决现有技术中的不足之处。

发明内容

针对上述问题，本发明提出一种白桦BpNAC100基因及其氨基酸序列和应用，本发明通过利用农杆菌介导法在白桦中表达BpNAC100基因启动子，获得了proBpNAC100::Luc转基因白桦植株，得出BpNAC100基因的启动子在白桦不同组织部位具有空间表达特异性，proBpNAC100::Luc转基因白桦植株对盐有响应；通过利用农杆菌介导法在白桦中过表达和抑制表达BpNAC100基因，获得了BpNAC100::GFP和BpNAC100-RNAi转基因白桦植株，得出BpNAC100::GFP转基因白桦植株具有抗盐害能力。

为实现本发明的目的，本发明通过以下技术方案实现:

本发明提供一种BpNAC100基因在白桦响应盐胁迫上的应用。

所述应用是在白桦的抗盐能力上的应用，所述BpNAC100基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。

所述BpNAC100基因的氨基酸的序列表如如序列表中SEQ ID NO:2所示。

所述BpNAC100基因的启动子的序列表如如序列表中SEQ ID NO:3所示。

本发明还提供一种白桦BpNAC100基因的获得及特异性表达分析方法，包括以下步骤:

步骤一:以无性系1年生的白桦为材料，然后提取白桦的DNA作为克隆载体，再根据欧洲白桦基因组获得BpNAC100基因上游2000bp序列，作为目标序列；

步骤二:设计引物进行克隆，将进行目标序列割胶回收后再连接到克隆载体，然后转化感受态细胞，并进行培养；

步骤三:选择3个单克隆摇菌进行测序，将3个单克隆摇菌利用限制性内切酶EcoRI和Bam HI进行处理，然后将目的条带连入pCMBIA1300-Luc植物表达载体中；