[发明专利]一种大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型及其构建方法

权利要求书

1.一种大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型，其特征在于，所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型为大鼠常规麻醉后，大鼠鼻孔处于45度向上倾斜，将0.6mL菌液以微量加样器滴入鼻腔，大鼠体位保持直立位1min，菌液进入气管支气管。

2.一种如权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型的构建方法，其特征在于，所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型的构建方法包括以下步骤：

步骤一，细菌接种于琼脂平板上，挑取单个菌落接种5mL LB培养液中37℃，振摇后将菌液离心，弃上清，细菌沉淀用无菌生理盐水洗涤2次，将细菌悬浮液用生理盐水调整OD600＝0.05菌液备用，获得P.aeruginosa的浮游菌；

步骤二，采用6孔板法构建BF，加入6孔板每孔加入0.1mL菌液+2mLLB肉汤培养基，放入37℃孵箱静置培养3d，第2天换液，培养3d后6孔板底部形成明显的膜状物，弃掉上清，用生理盐水洗涤2次以除去浮游菌，用细胞刮将在孔底部形成的BF刮下，转移到无菌离心管中在振荡器上充分震荡使BF分散开来，离心去上清用无菌生理盐水重悬稀释，获得细菌P.aeruginosa的被膜菌；

步骤三，涂片，染色观察铜绿假单胞菌生物膜；

步骤四，滴鼻感染，大鼠常规麻醉后，使大鼠鼻孔处于45度向上倾斜状态，将0.6mL菌液以微量加样器滴入鼻腔，改变大鼠体位，保持直立位1min，确保菌液进入气管支气管；感染1d，3d，7d，14d后检测大鼠肺部感染情况，病理变化。

3.如权利要求2所述的大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型的构建方法，其特征在于，所述步骤一中200rmin^-1振摇20h后将菌液3000rmin^-1离心10min。

4.如权利要求2所述的大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型的构建方法，其特征在于，所述步骤二中离心去上清用无菌生理盐水重悬稀释为OD600＝0.05的菌液。

5.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗慢性呼吸道感染的药物。

6.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗慢性泌尿生殖系统感染的药物。

7.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗骨髓炎的药物。

8.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗牙周炎的药物。

9.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗中耳炎的药物。

10.一种由权利要求1所述大鼠肺部铜绿假单胞菌生物膜感染模型得到的治疗留置导管感染的药物。