[发明专利]细胞培养方法、改造抗体、细胞培养基、细胞产品及其应用

权利要求书

1.一种细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：在培养体系中添加改造抗体；所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体，所述改造抗体与Fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与Fc受体的亲和力。

2.根据权利要求1所述的细胞培养方法，其特征在于，所述蛋白质改造的方式包括序列替换、点突变、序列插入、序列缺失、糖基化修饰和化学修饰中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的细胞培养方法，其特征在于，所述序列替换为将所述细胞培养用抗体的铰链区和Fc段替换为IgG2抗体或IgG4抗体的铰链区和Fc段；所述点突变为将所述细胞培养用抗体的铰链区和Fc段中的一个或多个位点的氨基酸进行突变；所述序列插入为将所述细胞培养用抗体的互补决定区插入到IgG2抗体、IgG4抗体或其他改造抗体的骨架上。

4.根据权利要求2所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养用抗体为IgG1抗体，所述点突变为将所述细胞培养用抗体的第228位、第233位、第234位、第235位、第236位、第239位、第250位、第252位、第254位、第256位、第257位、第311位、第318位、第320位、第322位、第326位、第327位、第329位、第330位、第331位、第332位、第333位、第428位、第433位和第434位氨基酸中的一个或多个进行突变。

5.根据权利要求1～4任一项所述的细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养用抗体为抗CD3抗体、抗CD16抗体、抗CD28抗体、抗CD52抗体或抗CD137抗体。

6.根据权利要求1～4任一项所述的细胞培养方法，其特征在于，所述改造抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或所述改造抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或所述改造抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述改造抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

7.根据权利要求1～4任一项所述的细胞培养方法，其特征在于，培养体系中有部分细胞的表面具有Fc受体，所述细胞选自淋巴细胞、粒细胞、肥大细胞、DC细胞、巨噬细胞、单核细胞和血小板中的一种或多种。

8.一种改造抗体，其特征在于，所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体，所述改造抗体与Fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与Fc受体的亲和力。

9.一种细胞培养基，其特征在于，包含基础培养基和权利要求8所述的改造抗体。

10.一种细胞产品，其特征在于，所述细胞产品为根据权利要求1～7任一项所述的细胞培养方法得到的细胞产品。

11.权利要求10所述的细胞产品在制备对肿瘤细胞具有杀伤作用的药物和试剂中的应用。

12.一种用于抗病毒和癌症治疗的药物，其特征在于，包括权利要求10所述的细胞产品。

13.根据权利要求12所述的药物，其特征在于，所述癌症包括肝细胞癌、肺癌、淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、头颈部癌和结直肠癌。

14.一种用于异体细胞治疗的药物，其特征在于，包括权利要求10所述的细胞产品。