[发明专利]一种人ApoE基因分型检测试剂盒

权利要求书

1.一种唾液DNA样本的人ApoE基因分型检测的试剂盒，所述试剂盒包括ApoE2分型检测的引物探针组合、ApoE4分型检测的引物探针组合，内参引物探针组合，以及PCR反应液，其中，ApoE2分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，探针核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；ApoE4分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，下游引物核苷酸序列如SEQID NO:5所示，探针核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；内参引物对核苷酸序列如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示，内参探针核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示；

在所述反应体系中，引物及探针的浓度范围为0.01-1μmol/L，MgCl₂终浓度选择1.5-2.0mM，等浓度的四种脱氧三磷酸腺苷(dNTPs)混合液终浓度为100-120nM，热启动DNA聚合酶浓度为1-2U/反应；

所述体系中还包括增效组合物，所述增效组合物选自终浓度为5-10mmol/L的1,6-二磷酸果糖二钙盐和5-10mmol/L的D-葡萄糖酸钙盐的组合、终浓度为5-10mmol/L的1,6-二磷酸果糖二钙盐和10-50mmol/L的D-半乳糖醛酸的组合、终浓度为5-10mmol/L的D-葡萄糖酸钙盐和10-50mmol/L的D-半乳糖醛酸的组合、终浓度为5-10mmol/L的1,6-二磷酸果糖二钙盐和10-50mmol/L的维生素C的组合。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述增效组合物选自1,6-二磷酸果糖二钙盐和D-半乳糖醛酸的组合、D-葡萄糖酸钙盐和D-半乳糖醛酸的组合。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述增效组合物为1,6-二磷酸果糖二钙盐和D-半乳糖醛酸的组合，在PCR反应体系中，1,6-二磷酸果糖二钙盐终浓度为5mmol/L，D-半乳糖醛酸终浓度为20mmol/L。