[发明专利]一种海洋真菌来源azaphilones二聚体类化合物及其制备方法

权利要求书

1.一种海洋真菌来源azaphilones二聚体类化合物，其特征是，所述化合物的结构式为 或。

2.一种制备权利要求1所述海洋真菌来源azaphilones二聚体类化合物的方法，其特征是，包括如下步骤：

（1）将格孢菌（Pleosporalessp.）HBU-135菌株接种于菌种培养基中进行菌种培养；其中，格孢菌（Pleosporalessp.）HBU-135菌株，保藏日期为2018年10月18日，保藏编号为CGMCC No.16379，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；

（2）菌种培养完成后，将其接种于发酵培养基中进行发酵，得到发酵物；

（3）用乙酸乙酯对发酵物进行萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后减压浓缩得到粗浸膏；

（4）对所得粗浸膏进行色谱分离即得所述azaphilones二聚体类化合物，所述的色谱分离为依次进行正相硅胶柱色谱分离、凝胶柱色谱分离、反相硅胶柱色谱分离和高效液相色谱分离。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征是，步骤（1）中，所述菌种培养基为：葡萄糖1.0–10wt%、酵母膏0.1–4.0wt%、蛋白胨0.2–4.0wt%、琼脂1.0–6.0wt%、粗海盐3.0–10wt%，其余为水；菌种培养温度为15–35℃，培养时间为3–10天。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征是，步骤（2）中，每单位份的所述发酵培养基包括：马铃薯40–120 g、葡萄糖10–30 g、CaCl₂ 5–40 g、水200–600 mL；发酵培养条件为在15–35℃下，摇床培养10–20天。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征是，步骤（4）中：

所述正相硅胶柱色谱分离为：先采用固定相为100~200目硅胶，流动相为1.5–3vol%甲醇/二氯甲烷混合溶液进行洗脱，洗脱体积为3−5个柱体积，将所得洗脱液浓缩后再采用固定相为200~300目硅胶，流动相为25–30vol%乙酸乙酯/石油醚混合溶液进行洗脱，洗脱体积为2−3个柱体积；

所述凝胶柱色谱分离的固定相为sephadex LH-20，流动相为40–60vol%甲醇/二氯甲烷混合溶液进行洗脱，洗脱体积为3−5个柱体积；

所述反相硅胶柱色谱分离采用的固定相为C₁₈硅胶，流动相为60–70vol%甲醇/水混合溶液，洗脱体积为2−3个柱体积；

所述高效液相色谱分离中采用的色谱柱为半制备C₁₈色谱柱，XBridge OBD，5μm，10 ×250 mm，流动相为70–90vol%的甲醇/水混合溶液。