[发明专利]用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法及从血浆中分离免疫球蛋白的方法

说明书

本发明公开了用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法及从血浆中分离免疫球蛋白的方法，涉及生物技术领域。用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法包括：将聚乙二醇、水和血浆形成的混合液进行静置；其中，聚乙二醇在混合液中的浓度为60‑100g/L。从血浆中分离免疫球蛋白的方法，采用上述方法沉淀免疫球蛋白。本申请采用聚乙二醇对血浆中的免疫球蛋白进行沉淀，通过改进聚乙二醇的用量经一次沉淀就能将血浆中的免疫球蛋白沉淀下来，且无需在特定pH下进行沉淀，其操作方便，适于工业化应用，具有很好的经济价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，且特别涉及用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法及从血浆中分离免疫球蛋白的方法。

背景技术

医用动物免疫球蛋白在动物保健、动物疫情紧急防御和免疫诊断等方面都发挥着重要作用。目前大规模生产高纯度动物免疫球蛋白是国内市场的空白，开发规模化的高纯度免疫球蛋白生产工艺是满足目前市场需求的必须方案。现阶段，血浆免疫球蛋白的主要生产方法包括：硫酸铵沉淀法、低温乙醇沉淀法、辛酸沉淀法等。

硫酸铵沉淀法生产免疫球蛋白，是利用硫酸铵在一定的饱和度下，能使免疫球蛋白沉淀，对沉淀复溶后，再进行盐析沉淀，能使免疫球蛋白纯度达到80％以上。该方法能很好的保持免疫球蛋白的活性，生产成本也比较低。但是，在沉淀过程中容易引起白蛋白的共沉淀，导致免疫球蛋白的纯度达不到要求，同时要消耗大量的硫酸铵废弃物。

低温乙醇法制备免疫球蛋白，是人血制品的基本生产方法，能够完全沉淀分离出免疫球蛋白，但是需要比较多的分批沉淀步骤，导致分批沉淀存在比较大的目标蛋白损失。沉淀分离的免疫球蛋白纯度在85％以上，整个生产过程需要严格控制反应温度，能耗大，车间要求条件高，需要大量存储乙醇。

辛酸沉淀法制备免疫球蛋白，是动物血提取免疫球蛋白的常用方法，能够针对免疫球蛋白以外的蛋白，在特定的pH条件下，使其他蛋白都沉淀，而只有免疫球蛋白存留在上清液中，达到从血浆中分离免疫球蛋白的目的，一般制备的免疫球蛋白纯度可以到80％以上。

动物免疫球蛋白是在生物诊断技术和动物保健紧缺的一种生化试剂，近年来宠物和经济动物养殖以及免疫诊断在快速发展，免疫球蛋白的需求量迅速增加，需要吨级的供应量才能满足整个行业的需求。国内的免疫球蛋白生产企业大都采用以上的方法进行生产，因为工艺的限制，最终产品的外观和理化性质均不能达到实验和动物保健的实际要求，同时产量也远远不能满足市场需求。目前，免疫球蛋白还是依赖进口，动物养殖对于免疫球蛋白的需求只能在低层次的产品上徘徊。

此外，科研和医疗应用标准的免疫球蛋白，必须满足纯度高(96％以上)、残留杂质对实验和动物干扰小(低内毒素、低杂蛋白)、蛋白稳定性好等要求。以往采用的方法为了追求产量，采用的工艺技术相对比较粗放，产品的纯度远远达不到要求，注射级产品标准更是目前方法无法完成的。

鉴于此，提出本申请。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法，其能够经过一次沉淀就将血浆中的免疫球蛋白分离下来，操作方便显著提升了生产效率。

本发明的另一目的在于提供一种从血浆中分离免疫球蛋白的方法，其生产效率高，便于工业化推广。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出了一种用于沉淀血浆中免疫球蛋白的方法，包括：

将聚乙二醇、水和血浆形成的混合液进行静置；

其中，聚乙二醇在混合液中的浓度为60-100g/L。

本发明提出了一种从血浆中分离免疫球蛋白的方法，采用上述方法沉淀免疫球蛋白。