[发明专利]一株产酸性菊粉酶的植物乳杆菌及其应用在审

专利信息
申请号: 202010237731.3 申请日: 2020-03-30
公开(公告)号: CN111235073A 公开(公告)日: 2020-06-05
发明(设计)人: 王成华;陈睿;黄澄;李晓明;陆迪 申请(专利权)人: 南宁中诺生物工程有限责任公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/24;C12P19/14;C12P19/02;C12R1/25
代理公司: 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 代理人: 王素娥
地址: 530003 广西壮族*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 一株产 酸性 菊粉 植物 杆菌 及其 应用
【权利要求书】:

1.一株产酸性菊粉酶的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum3-2,其特征在于,其序列如下:

该菌株已于2019年11月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M201997。

2.权利要求1所述的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum 3-2在生产酸性菊粉酶中的应用,其特征在于,包括如下步骤:

(1)种子培养

将植物乳杆菌Lactobacillus plantarum 3-2划线至MRS固体培养基中,于30℃条件下静置培养直至出现单菌落;所述的MRS固体培养基配方如下:

牛肉膏10g,酵母粉5g,蛋白胨10g,磷酸氢二钾2g,柠檬酸二铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸镁0.58g,硫酸锰0.25g,吐温-80 1mL,琼脂20g,蒸馏水1000mL,在pH 6.6~6.8、121℃高压灭菌15min;

20%葡萄糖储备液:用超纯水配制葡萄糖溶液200g/L,121℃高压灭菌20min;

使用时加入终浓度为2%的葡萄糖储备液;

(2)发酵培养

将MRS固体培养基中的单菌落划线至固体发酵培养基中,于30℃条件下静置培养直至出现单菌落;挑取固体发酵培养基上正常生长的单菌落,接种到液体发酵培养基中,在温度为30℃的条件下,静置发酵1~2天,得到发酵液;所述固体发酵培养基配方如下:

牛肉膏10g,酵母粉5g,蛋白胨10g,磷酸氢二钾2g,柠檬酸二铵2.0g,乙酸钠5.0g,硫酸镁0.58g,硫酸锰0.25g,吐温-80 1mL,琼脂20g,蒸馏水1000mL,在pH 6.6~6.8、121℃条件下高压灭菌15min;

20%葡萄糖储备液:用超纯水配制葡萄糖溶液200g/L,在121℃条件下高压灭菌20min;

(3)制备酸性菊粉酶

吸取发酵液10mL,在4℃、10000r/min条件下,离心5min,弃去上清液,保留沉淀,向沉淀中加入0.2mol/L、pH 5.0的醋酸缓冲溶液400μL重悬沉淀后,加入100mg/ml的溶菌酶200μL,于30℃条件下静置2h,再加入0.12g石英砂,随后在-30℃条件下于高通量组织研磨器研磨240s,破胞结束后,在4℃、13000r/min条件下离心30min,取上清液,即为酸性菊粉酶。

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