[发明专利]鸡骨草总黄酮的提取方法

说明书

本发明公开了一种鸡骨草总黄酮的提取方法，将鸡骨草干燥，粉碎，加入有机溶剂，再加纤维素酶、果胶酶、酒石酸、氯化钠、乙二胺四乙酸二钠、L‑半胱氨酸，搅拌均匀，浸泡；将提取液加热回流提取，抽滤，经旋转蒸发仪浓缩，得提取物粗品；粗品溶于蒸馏水，离心，取上清液上样于大孔吸附树脂柱上；先用水洗脱至无浑浊，再用乙醇和乙醇乙酯洗脱剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩回收溶剂；得浸膏，干燥，得鸡骨草总黄酮。本方法利用纤维素酶、果胶酶及酒石酸浸泡鸡骨草再用乙醇和乙酸乙酯提取，利于鸡骨草黄酮类有效成分的浸出，提高黄酮的提取率；用氯化钠、乙二胺四乙酸二钠、L‑半胱氨酸浸泡，使粉碎后的药材不易发生氧化，提高黄酮类化合物的稳定性。

技术领域

本发明涉及天然植物有效成分提取技术领域，具体是一种鸡骨草总黄酮的提取方法。

背景技术

鸡骨草（Abrus cantoniensis Hance ）又称广东相思子，是豆科相思子属的一种植物，别名为红母鸡草、石门坎、细叶龙鳞草、大黄草等，主要分布在山地或旷野灌木林边，以广东、广西等地多见。鸡骨草味甘微苦、性凉，归肝、胆、胃经。具有清热解毒，舒肝止痛的功能。鸡骨草可在春夏潮湿季节用鸡骨草煲汤作食疗，是治疗黄疸、急、慢性肝炎、乳腺炎等的有效药物，还具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和抗氧化等功能。

近年来，对鸡骨草的研究越来越深入，其药用价值日益受到国内外学者的重视鸡骨草的其他化学成分提取已经成为了研究热点。植物黄酮类化合物是一种天然的抗氧化剂，因其能清除人体内的游离自由基，抑制自由基的产生，可作为天然的食品防腐剂，广泛应用于产品的保鲜和加工中。目前也有学者对鸡骨草总黄酮的提取有了一定研究，如专利CN 201110177604.X公开了一种鸡骨草总黄酮的制备方法，其特征是将干燥的鸡骨草粉碎过40 目筛，以水为提取剂，采用纤维素酶提取，纤维素酶用量是鸡骨草原料质量的0.3％～0.5％，提取剂水的体积与鸡骨草原料质量之比12ml/g ～ 16ml/g，pH 值4.4 ～ 5.2，酶解温度45℃～ 55℃，酶解时间80min ～ 100min，得提取液；提取液过滤后调整总黄酮质量浓度和pH 值得上样液，然后采用AB-8 型大孔吸附树脂吸附，上样液流速1.0BV/h ～ 2.0BV/h，上样液中总黄酮质量浓度1.5mg/ml ～ 2.0mg/ml，上样液pH 值4.5 ～ 5.5 ；洗脱剂洗脱，所述的洗脱剂为体积份数60％～ 75％的乙醇，洗脱剂流速0.5BV/h ～ 1.0BV/h，洗脱剂用量为2.3BV ～ 3.0BV，得洗脱液；减压浓缩和冷冻干燥，得鸡骨草总黄酮产品。该方法主要是将鸡骨草粉碎后加入纤维素酶酶解用水浸提，提纯，减压，干燥后即得鸡骨草总黄酮。现有的方法总黄酮的提取率较低，且产品的纯度低，且由于黄酮类结构中存在酚羟基，稳定性较差，直接粉碎后提取很容易发生氧化。

发明内容

本发明针对上述问题，提供一种鸡骨草总黄酮的提取方法。本方法利用纤维素酶、果胶酶及酒石酸浸泡鸡骨草后再用乙醇和乙酸乙酯提取，利于鸡骨草黄酮类有效成分的浸出，提高黄酮的提取率；再用氯化钠、乙二胺四乙酸二钠、L-半胱氨酸浸泡，使得粉碎后的药材不易发生氧化，提高黄酮类化合物的稳定性；纯化过程中上柱后采用石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，有效提高总黄酮的纯度。

为了实现以上目的，本发明采用的技术方案如下：

一种鸡骨草总黄酮的提取方法，包括如下步骤：

（1）将新鲜鸡骨草干燥，粉碎，得鸡骨草粉，按照料液比为1:15-20g/L的用量加入有机溶剂，所述有机溶剂由乙醇和乙酸乙酯组成，再加入纤维素酶、果胶酶、酒石酸、氯化钠、乙二胺四乙酸二钠、L-半胱氨酸，搅拌均匀，浸泡0.5-1.5h，得提取液；

（2）将提取液加热回流提取，抽滤，经旋转蒸发仪浓缩去除溶剂，得提取物粗品；