[发明专利]一种用于小动物长时间活体成像的装置及其使用方法

说明书

本发明公开了一种用于小动物长时间活体成像的装置及其使用方法，该装置包括固定装置底座，设于固定装置底座上的加热垫、高度可调的成像平台固定支柱、位置可调的小动物固定支柱，以及通过成像平台固定支柱固定的成像固定平台；所述的成像固定平台包括非脑部成像固定平台和脑部成像固定平台。该装置能针对不同观察位置对动物进行固定，确保成像过程的稳定，并可以对成像的位置进行定位，保证长时间、多时间节点稳定成像，并能根据不同大小的动物进行灵活调整适配。采用该方法进行小动物活体成像，可灵活匹配不同大小的实验动物，且适用于不同成像部位，并可实现精确定位。

技术领域

本发明涉及一种用于小动物长时间活体成像的装置及其使用方法，主要用于啮齿目(如小鼠、大鼠、豚鼠等)、兔形目(如兔、鼠兔等)、小型灵长类(如狨猴等)等小型实验动物的固定，并用于活体、长时间成像，以研究小型实验动物在清醒或麻醉情况下，体内血流、不同种类细胞、离子的动态变化。

背景技术

在生命科学研究中，活体实验是对体外实验的重要补充和验证，在活体研究中，使用双光子显微镜对动物活体组织进行动态观察是一种重要的研究手段。双光子显微镜结合了激光共聚焦显微镜和双光子激发技术的优势，利用长波长激发，比短波长对细胞的光毒性小，穿透能力强，且只有在焦平面上的荧光分子才能被激发，所以，双光子显微镜比普通荧光显微镜更适合用来观察厚标本、活细胞或活体标本。利用双光子显微镜，可以实现对标本的多色、长时间、多时间点的观察。传统方法是通过取局部组织，放置在相应培养液中进行观察，或者利用小动物固定装置对局部进行固定后，在双光子显微镜下观察。由于受动物呼吸、心跳等动态影响、以及部分组织结构柔软等特点的影响，观察标本的固定是双光子显微成像的一大难题。常见的动物固定装置难以适应大部分组织，观察范围有限，也难以实现对同一个位置的长时间、多时间点的动态观察。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的主要目的在于提供一种小动物长时间活体成像固定装置及其使用方法，该装置能够针对小动物不同观察位置(如脑部、腹部、四肢等)进行固定，确保成像过程中的稳定，并可以对成像的位置进行定位，能够保证长时间、多时间节点的稳定成像。并能根据不同大小的动物进行灵活调整适配。

为实现以上目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于小动物长时间活体成像的装置，包括：固定于显微镜平台或防震台上的固定装置底座，设于固定装置底座上的加热垫、高度及位置可调的成像平台固定支柱、位置可调的小动物固定支柱，以及通过成像平台固定支柱固定的成像固定平台；所述的成像固定平台包括非脑部成像固定平台和脑部成像固定平台；所述的加热垫为可温控加热垫；

所述的非脑部成像固定平台中间设有带螺纹的固定孔，用于放置玻璃底皿；所述的玻璃底皿顶端还设有中空固定盖，所述的中空固定盖包括位于外部的中空固定盖螺纹部分和位于中心的固定盖中空部分，所述的固定盖中空部分包括上下两部分，上部开孔的直径小于下部开孔直径；中空固定盖螺纹部分用于固定玻璃底皿；所述的带螺纹的固定孔的螺纹与中空固定盖螺纹部分的外螺纹相配合；

所述的脑部成像固定平台上设有不规则的成像平台开孔，所述的成像平台开孔包括位于中间的成像孔和两个位于边缘的刺激及信号记录孔；所述的成像孔大于刺激及信号记录孔。

上述技术方案中，进一步地，所述的固定装置底座为矩形铝材，其上分布有螺孔阵列。考虑成像平台固定支柱的可调性，固定装置底座上位于边缘的螺孔密度大于其它部分。

更进一步地，所述的固定装置底座上的螺孔尺寸与显微镜平台或防震台上分布的螺孔相匹配，便于将固定装置底座固定于显微镜平台或防震台上。

进一步地，所述的成像平台固定支柱和小动物固定支柱下端均设有螺纹，二者均可直接与固定装置底座上的螺孔配合固定。