[发明专利]一种新型软骨脱细胞基质墨水的制备方法

权利要求书

1.一种新型软骨脱细胞基质墨水的制备方法，包括：

(1)将软骨脱细胞基质在沸水中连续加热5-12h，然后冷冻干燥；

(2)将步骤(1)中冷冻干燥后的软骨脱细胞基质溶解在HCl的胃蛋白酶溶液中，搅拌，得到软骨脱细胞基质溶液，其中软骨脱细胞基质溶解在HCl的胃蛋白酶溶液中的浓度为8-12mg/mL；

(3)将步骤(2)中软骨脱细胞基质溶液调节pH值为7.0-8.0，滴加甲基丙烯酸酐、甲基丙烯酸缩水甘油酯或丙烯酰氯，搅拌反应，加入去离子水，透析，冷冻干燥，得到丙烯酰胺化软骨脱细胞基质，其中软骨脱细胞基质与甲基丙烯酸酐、甲基丙烯酸缩水甘油酯或丙烯酰氯的物料比为1g/ml；

(4)将步骤(3)中丙烯酰胺化软骨脱细胞基质溶解在HCl的胃蛋白酶溶液中，加入光引发剂，搅拌反应，得到软骨脱细胞基质墨水。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中软骨脱细胞基质来源于哺乳动物的软骨；软骨脱细胞基质是通过物理或化学处理方法制备得到的。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中搅拌温度为室温，搅拌时间为12-24h。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)和(4)中HCl的胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度为0.8-1.2mg/ml，盐酸浓度为0.008-0.012M。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中搅拌反应温度为20℃，搅拌反应时间为12-24h。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(4)中光引发剂包括2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮、1-羟基环己基苯基甲酮、2-甲基-2-(4-吗啉基)-1-[4-(甲硫基)苯基]-1-丙酮、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦或2-羟基-2-甲基-1-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-1-丙酮。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(4)中搅拌反应温度为室温，搅拌反应时间为10-15h。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(4)中软骨脱细胞基质墨水与细胞混合制备生物墨水。

9.一种如权利要求1所述方法制备得到的软骨脱细胞基质墨水。

10.一种如权利要求1所述方法制备得到的软骨脱细胞基质墨水的应用。