[发明专利]检测绿原酸类化合物方法和试剂盒

说明书

本发明公开了检测绿原酸类化合物方法和试剂盒，其中，检测绿原酸类化合物的方法包括：将待测样品进行提取处理，以便得到待测液；以及利用液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱质谱联用系统对所述待测液进行检测，以便对所述绿原酸类化合物进行定性分析和/或定量分析。该检测方法简单快速，准确性和灵敏度高。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体地，涉及检测绿原酸类化合物方法和试剂盒，更具体地，涉及检测绿原酸类化合物的方法和试剂盒，以及判断待测化合物是否为绿原酸类化合物的方法。

背景技术

目前，临床中对绿原酸的功效成分研究已经有大量报导，但是研究还大多针对的是对从山银花和金银花中获得的已知的几种含量较高的绿原酸类化合物的研究，而对于绿原酸类化合物特别是新型绿原酸类天然产物的发现，目前还缺乏较好的分析方法。

由此，检测绿原酸类化合物的方法有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种检测绿原酸类化合物的方法，该方法检测过程简单快速，准确性和灵敏度高，尤其适于药食同源产品中绿原酸类化合物的检测。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种检测绿原酸类化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将待测样品进行提取处理，以便得到待测液；以及利用液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用系统对所述待测液进行检测，以便对所述绿原酸类化合物进行定性分析和/或定量分析。

本发明中所用术语“绿原酸类化合物”(chlorogenic acid，CGA)：是指由咖啡酸(Caffeic acid)与奎尼酸(Quinic acid，1-羟基六氢没食子酸)生成的缩酚酸一类天然酚类化合物。目前已有商业化的绿原酸类化合物标准品主要包括(3-咖啡酰奎尼酸(3-caffeoylquinic acid，3-CQA)、4-咖啡酰奎尼酸(4-CQA)、5-咖啡酰奎尼酸(5-CQA)、3，4-二咖啡酰奎尼酸(3，4-dicaffeoylquinic acid 3,4-diCQA)、3，5-二咖啡酰奎尼酸(3,5-diCQA)、4，5-二咖啡酰奎尼酸(4,5-diCQA)等，但尚有很多绿原酸类化合物无法获得标准品。如图1所示，奎尼酸C3、C4和C5等多个位点均可以结合咖啡酸，此外，还有些类似咖啡酸的结构也可以和奎尼酸结合，因此，绿原酸类化合物有很多种。

根据本发明实施例的检测绿原酸类化合物的方法，利用液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用系统对待测液进行检测，能够精确测定化合物分子离子质量数和或碎片离子质量数，检测结果偏差小，根据其精确分子离子质量数和保留时间对样品中的绿原酸类化合物的含量进行精准定量，根据本发明的一些实施例，无需使用标准品即可对待测样品中所有绿原酸类化合物进行精准定性分析，检测过程简单快速，准确性和灵敏度高。

另外，根据本发明上述实施例的检测绿原酸类化合物的方法还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，所述待测样品为药食同源产品，也就是说，既是食品又是药品的物品。在这里泛指能够作为药品、保健品及食品等中药材产品。

根据本发明的实施例，所述检测的流动相的有机相为甲醇，无机相为0.08-0.12体积％甲酸/水溶液。发明人研究发现，流动相中有机相为甲醇时比乙腈等有机试剂有更好的分离度,甲酸/水溶液体系比仅仅水溶液有更好的灵敏度。

根据本发明的实施例，所述检测的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的条件为：0-2.0min为5％A,2.0-20.0min流动相由5％A增加到80％A；流速：0.3mL/min。由此，该洗脱条件有利于将不同结构的化合物进行分离。