[发明专利]一种ZIF纳米酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，步骤包括：

1）铜纳米团簇CuNCs的制备：

将谷胱甘肽水溶液与 CuSO₄·5H₂O水溶液充分混合，调节pH=7，待溶液由白色悬浊状态变至澄清透明状态后，得铜纳米团簇溶液；

2）铜纳米团簇加Al离子CuNCs+Al³⁺溶液的制备：

在所述铜纳米团簇溶液中加入0.1 M的Al离子水溶液,搅拌5分钟，待溶液由澄清透明状态变至白色浑浊状态，得CuNCs+Al³⁺溶液；

3）纳米酶CuNCs-GOx/ZIF-90溶液的制备：

在所述CuNCs+Al³⁺溶液中加入葡萄糖氧化酶，再与ZIF-90 DMF溶液混合，混合均匀搅拌12 h，静置30-60分钟，移除上清液，8000–10000 rpm离心5–10分钟，再用5-10 mL DMF溶液洗涤3次，洗涤后8000–10000 rpm离心5–10分钟，烘干后得纳米酶CuNCs-GOx/ZIF-90。

2.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述谷胱甘肽水溶液的浓度为50 mM， 所述CuSO₄·5H₂O水溶液的浓度为10 mM，谷胱甘肽和 CuSO₄·5H₂O的摩尔比是5:1。

3.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述铜纳米团簇溶液中的铜纳米团簇和Al离子水溶液中的Al离子的摩尔比是5:1。

4.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述CuNCs+Al³⁺、葡萄糖氧化酶以及ZIF-90的摩尔比是5:1:10。

5.一种ZIF纳米酶，其特征在于，如权利要求1-4任一项所述的ZIF纳米酶的制备方法制备得到。

6.一种ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述应用是ZIF纳米酶应用于生物体内葡萄糖的检测。

7.如权利要求6所述的ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

将大脑皮层微透析液100 μL加入到200–500 μL ZIF纳米酶溶液中，混匀后加入aCSF溶液至1 mL；在25–37 ℃温度下孵育10–60分钟；在365 nm的激发波长下测定其荧光发射强度，并将强度值代入线性关系式，确定葡萄糖的浓度范围。

8.如权利要求7所述的ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述检测葡萄糖的线性关系式的获得是：取100 μL含有0-1 mM不同浓度葡萄糖的Tris-HCl溶液分别加入盛有400 μL的2mg/mL的ZIF纳米酶水溶液的离心管中，室温下反应五分钟后，超纯水定容至2 mL，最终的混合溶液在37 ^°C的条件下孵化60分钟，以365 nm为激发波长测定发射强度，并将得到的实验数据整理作图获得线性关系式，线性关系为I₀-I/I₀=0.0011c₁+0.0310（10-100 μM）、I₀-I/I₀=0.00011c₂+0.1126 （100-1000 μM），其中I₀为不加葡萄糖时的荧光强度，I为加入不同浓度葡萄糖后的荧光强度。