[发明专利]一种金花茶系统发育树的构建方法

说明书

本发明属于植物分析技术领域，具体涉及一种金花茶系统发育树的构建方法，该方法包括以下步骤：将n种样品的金花茶植物新鲜叶片研磨成的粉末分别加入到萃取溶液中进行超声萃取，得到n种金花茶植物萃取液；其中，n≥2；将n种金花茶植物萃取液分别用移液枪涂覆于玻碳电极表面，待其干燥后得到n种修饰电极；将n种修饰电极分别置于磷酸盐缓冲溶液中进行线性伏安扫描，n种修饰电极得到n种电化学信号；将n种电化学信号分别进行归一化处理，得到n种归一化处理电化学信号；通过对n种归一化处理的电化学信号进行聚类算法分析，构建出n种样品的金花茶植物系统发育树。

技术领域

本发明属于植物分析技术领域，具体涉及一种金花茶系统发育树的构建方法。

背景技术

金花茶植物隶属于山茶科山茶属，其花瓣花冠呈金黄色并具有蜡质，鲜润艳丽，艳冠群芳，是世界上著名的观赏植物，曾被誉为“茶族皇后”。金花茶植物的花和叶都是民间壮药，可用于治疗咽喉炎、痢疾、高血压、便血和月经不调等疾病。此外，金花茶的药效研究表明，金花茶具有降血糖血脂15-61、抗肿瘤和抗氧化等功效。由于多种特殊的药用功效，引起各界开发商们的高度关注。

由于金花茶植物具有金黄色花瓣，在园林茶花新品种培育上有着重要的经济价值，因而引起了国内外专家学者的热切关注和相关部门的高度重视。目前已发表的金花茶植物共有40多种，但由于金花茶植物的分布范围十分狭窄，其外部形态特征又比较相似，一些物种的生态型或一些具有可变异特征的标本被确立为独立的种，造成了金花茶植物的分类出现了较大的分歧。比如，通过对淡黄金花茶几个种的花、果实、种子和叶片形态学特征进行了比较分析，结果显示，武鸣金花茶是一个独立的种，支持把毛籽金花茶和陇瑞金花茶归并为弄岗金花茶，将直脉金花茶和多瓣金花茶合并为多变金花茶。利用金花茶植物的核型进行了聚类分析，结果表明，核型近似类聚可为4类：毛瓣金花茶和小果金花茶为一类，弄岗金花茶、凹脉金花茶、柠檬黄金花茶和东兴金花茶为一类，陇瑞金花茶、淡黄金花茶、武鸣金花茶和夏石金花茶为一类，剩下的金花茶、防城金花茶、平果金花茶和显脉金花茶为一类。

蛋白质电泳技术研究了金花茶之间的亲缘关系，结果表明，防城金花茶与金花茶两者之间的亲缘关系最近，平果金花茶与东兴金花茶有较近的亲缘关系、毛籽金花茶与弄岗金花茶也有较近的亲缘关系。利用随机扩增多态性DNA分子标记手段对金花茶植物的系统发育关系研究表明，防城金花茶与金花茶亲缘关系很近，支持把防城金花茶归并为金花茶，把金花茶、东兴金花茶、毛瓣金花茶、平果金花茶和顶生金花茶处理为一个独立的种。除此之外，AFLP、ISSR及核基因ITS序列等分子手段也用于了金花茶的分类处理上，但是各资料比较零散，研究者的观点不一致，所涉及的物种也不够全面，使人们对金花茶的认识还不够统一。

综上，本发明针对现有金花茶植物系统发育分析技术不完善的现状，设计了一种利用金花茶叶片的电化学信号进行系统发生研究的分析技术。该方法能够迅速捕捉到金花茶叶片中电化学活性组分的信号，对植物基因层面信息进行呈现，最终进行系统发生研究。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中金花茶植物系统发育分析技术不完善的问题，提出了一种金花茶系统发育树的构建方法。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种金花茶系统发育树的构建方法，包括以下步骤：

(1)将n种样品的金花茶植物新鲜叶片研磨成的粉末分别加入到萃取溶液中进行超声萃取，得到n种金花茶植物萃取液；其中，n≥2；

(2)将n种金花茶植物萃取液分别用移液枪涂覆于玻碳电极表面，待其干燥后得到n种修饰电极；

(3)将n种修饰电极分别置于磷酸盐缓冲溶液中进行线性伏安扫描，n种修饰电极得到n种电化学信号；

(4)将n种电化学信号分别进行归一化处理，得到

n种归一化处理电化学信号；