[发明专利]一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法在审
申请号: | 202010250609.X | 申请日: | 2020-04-01 |
公开(公告)号: | CN111323281A | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 金黑鹰;刘建磊 | 申请(专利权)人: | 金黑鹰 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/38;G01N1/40 |
代理公司: | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人: | 文莹森 |
地址: | 210049 江苏省南京市栖霞区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 粪便 脱落 粘膜 样品 提取 方法 | ||
1.一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:包括如下步骤:
采集粪便装入粪便采集盒,在粪便采集盒中加入中性固定液,将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀;
将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中,震荡后收集过滤液装入离心瓶;
对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀。
2.如权利要求1所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:所述粪便采集盒中安装有若干层用于过滤的过滤网。
3.如权利要求2所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:所述过滤网上均放置有若干用于挤压粪便的瓷珠。
4.如权利要求3所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:装入粪便采集盒的粪便为1~150g,加入粪便采集盒的中性固定液为300~750ml。
5.如权利要求1或4所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:所述粪便采集盒在震荡器中以150rpm的振动频率震荡20min,震荡后收集粪便采集盒中的过滤液装入离心瓶。
6.如权利要求5所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:收集装入离心瓶的过滤液为250ml。
7.如权利要求1或6所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:对离心瓶中的过滤液离心四次后获取最终沉淀。
8.如权利要求7所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法,其特征在于:对离心瓶中的过滤液的过滤方法如下:
将装有250ml过滤液的离心瓶放入离心机,在4℃、4000rpm条件下离心20min,保留50ml上清液弃掉其余上清液,用移液器轻轻吹浮沉淀表面,将包含有沉淀的液体移至50ml离心管中;
将50ml离心管放入离心机,在4℃、5000rpm条件下离心20min,保留20ml上清液弃掉其余上清液,轻轻吹浮沉淀表面,将包含有沉淀的液体移至20ml离心管中;
将20ml离心管放入离心机,在4℃、5000rpm条件下离心20min,保留5ml上清液弃掉其余上清液,轻轻吹浮沉淀表面,将包含有沉淀的液体移至5ml离心管中;
将5ml离心管放入离心机,在4℃、12000rpm条件下离心1min,弃掉所有上清液,获取最终沉淀。
9.一种基于权利要求1~8任一项所述用于粪便脱落肠粘膜样品提取的粪便采集盒,其特征在于:包括:
容器组件(100),所述容器组件(100)包括盒体(101)和盖设在盒体(101)上的盒盖(102);
采集组件(200),所述采集组件(200)包括一个以上的滤珠(201)和滤网(202),所述滤网(202)包括上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c),所述上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c)在盒体(101)内从上至下依次设置,且所述上层滤网(202a)为150目,所述中层滤网(202b)为200目,所述下层滤网(202c)为300目,所述滤珠(201)放置在上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c)上。
10.如权利要求9所述的粪便采集盒,其特征在于:所述滤珠(201)的直径为2~8mm,且滤珠(201)的重量为0.5~0.7g,上层滤网(202a)上有5~50颗滤珠(201),中层滤网(202b)和下层滤网(202c)上均有5~30颗滤珠(201)。
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