[发明专利]一种金耳子实体直接再生培养法

说明书

本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种金耳子实体直接再生培养法，以金耳子实体组织块单独培养，或与外源毛韧革菌一起培养，从而将小的金耳子实体组织块直接生长成大的金耳子实体。该培养法可提高金耳菌种制作的成功率，以及金耳栽培袋的接种成功率，缩短培养周期，有利于金耳的现代化、工厂化栽培。

技术领域

本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种金耳子实体直接再生培养法。

背景技术

现有腐生性食用菌栽培都是由子实体或菌丝体培养形成菌丝体的纯培养物(固体或液体菌种)，再用菌丝体的纯培养物(固体或液体菌种)转接到培养料上培养菌丝体，然后诱导菌丝体形成子实体原基，最后培养形成子实体(产品)。木腐菌以香菇^[1,2,3,4]、金针菇^[5,6,7]为代表；草腐菌以双孢蘑菇^[8]、草菇^[9,10,11]为代表，具体工艺如图1所示。

现有寄生菌(银耳和金耳)培养工艺为：混合菌种接种或两种纯菌种混合后接种，先培养出混合菌丝体，再诱导原基产生，最后发育为子实体(蘑菇)。例如，银耳^{[12,13,14,15,16]}的培养工艺可参见图2，而金耳^{[17,18,19,20,21,22,23]}的培养工艺参见图3。

可见，现有的食用菌培养方法都需经历菌种转接到培养料上培养菌丝体，然后诱导菌丝体形成子实体原基，再培养子实体原基逐渐长成小子实体，最后培养形成子实体(产品)的过程。

然而，现有金耳培养工艺中转接时以寄主和寄生菌的混合培养物进行接种，或以两者的分别培养物混合后进行接种，接种到菌种培养基或栽培袋后，两者的混合物首先需要萌发菌丝，以菌丝的形式生长到一定的生理成熟度后通过诱导产生金耳原基(混合菌丝培养之目的是形成金耳子实体原基，而原基是必要步骤)，然后再经过出菇管理获得金耳子实体。金耳子实体培养的关键在于纯金耳菌丝与毛韧革菌菌丝之间的合适配比，只有两者配比合适时才能培养出金耳子实体，反之则不能获得金耳子实体。现行的培养工艺中纯金耳菌丝与毛韧革菌菌丝两者以混合物的形式转接到培养基后两者需重新建立寄生关系，此过程的机制目前并未研究清楚，所以经常出现两者配比不合适的情况，在制作菌种时导致出现无效菌种和菌种状态不一致，在接种栽培袋时导致出现不出菇的菌包(25％)和出菇不整齐(子实体一潮菇成熟度一致率40％)，且培养周期长达70～80天。此外，现有金耳子实体培养技术不适用于现代化、工厂化出菇的需求。

发明概述

本发明提出一种金耳子实体直接再生培养法，用于提高金耳菌种制作的成功率(即，再生率)，以及金耳栽培袋的接种成功率，缩短培养周期，并且适应金耳现代化、工厂化栽培的工艺要求。

发明人在进行金耳基础生物学研究时发现，在适宜配方的培养基中金耳子实体组织块不按照“组织脱分化形成菌丝，然后菌丝再分化形成子实体”的过程发育，可以直接再生长大为新的子实体，其原理为：金耳子实体是异质型子实体，由金耳和毛韧革菌两种菌组成的复合体(即金耳子实体自身同时含两个物种)，纯金耳菌丝的生长要依靠毛韧革菌为其提供营养。由于毛韧革菌菌丝有较强的活力和较强的分解培养基的能力，在金耳子实体组织块接种到适宜配方的培养基后，其中的毛韧革菌菌丝能快速萌发生长，分解利用培养基内的养分，使金耳组织块的营养供应途径在其脱分化之前快速重建，从而使小块的金耳子实体组织在不进行脱分化、再分化的情况下直接恢复生长的能力。即小块金耳子实体中的毛韧革菌和金耳菌的菌丝细胞都可以直接进行细胞分裂、生长，并再生为新的完整的大的金耳子实体。一个1克的金耳子实体小块可以直接生长成为300克、甚至400克大的完整的子实体(蘑菇)，从而实现栽培的目的。

基于上述发现和原理，发明人发明了一种金耳子实体直接再生培养法(如图4所示)，其特点是在整个培养过程中，金耳培养物始终以部分或完整的金耳子实体的形态存在，不发生脱分化为菌丝的过程。