[发明专利]一种自养氨氧化菌及其筛选方法

说明书

本发明公开了一种自养氨氧化菌，分类命名为欧洲亚硝化单胞菌NE‑1，保藏编号为CCTCC NO：M2019754。本发明还公开了一种自养氨氧化菌的筛选方法，包括以下步骤：S1预处理步骤：对活性污泥用生理盐水进行冲洗得到待富集原泥；S2富集驯化步骤：将待富集原泥接种到富集培养基中进行富集培养，当NH₄⁺‑N低于0～10mg/L时，转接到新的富集培养基中，重复富集驯化3～6次，根据DGGE检测氨氧化基因的丰度得到目标污泥；S3分离纯化步骤：将目标污泥氨氧平板培养，选择产生NO₂^–‑N但未产生NO₃^–‑N的菌株，最后在富集培养基中转化纯化培养3～5次得到目标菌株。

技术领域

本发明涉及氨氧化菌生物技术领域，尤其涉及到一种自养氨氧化菌及其筛选 方法。

背景技术

畜禽养殖业的规模化、集约化发展，在提高人民生活水平的同时，也产生了 大量含有高浓度氨、磷污染物的畜禽废水，若不加处置将导致严重的环境问题， 威胁人类健康。当前畜禽废水的脱氮技术主要以基于相关功能微生物的生化措施 为主。其中，自养氨氧化菌在其中的氮素循环中扮演了极其重要的角色：由其主 导的将氨氮(NH₄⁺-N)转变为亚硝酸盐氮(NO₂^–-N)的过程为整个生物脱氮反应 的关键限速步骤，是一种较为可行的处理NH₄⁺-N的措施。目前筛选得到的氨氧化 菌的氨氮转化能力较弱，不满足工业化处理高氮含量的畜禽污水的要求。

发明内容

本发明的目的之一在于提供了一种氨氮转化能力强的自养氨氧化菌，以解决 背景技术中提到的技术问题。

本发明是通过以下技术方案实现的：本发明公开了一种自养氨氧化菌，所述 自养氨氧化菌的分类命名为欧洲亚硝化单胞菌NE-1(Nitrosomonas europaea NE-1)，保藏编号为CCTCC NO：M2019754。所述欧洲亚硝化单胞菌NE-1于2019 年9月25日保藏于中国.武汉.武汉大学.中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。

本发明的目的之二在于提供了一种自养氨氧化菌的筛选方法。

一种自养氨氧化菌的筛选方法，包括以下步骤：

S1预处理步骤：取100份液体活性污泥，离心去上清液得到固体活性污泥， 用无菌生理盐水对所述固体活性污泥洗涤2～4次，得到待富集原泥；

S2富集驯化步骤：将所述待富集原泥接种到富集培养基中进行摇床培养， 培养温度为23～34℃，转速为100～300r/min，pH维持在7.0～7.8，水含氧量维持 在6～20mg/L，所述富集培养基中的NH₄⁺-N的初始浓度为200～220mg/L，当所述富 集培养基中的NH₄⁺-N浓度低于0～10mg/L时，补加NH₄⁺-N使得所述富集培养基中 NH₄⁺-N浓度恢复至150～200mg/L，当NH₄⁺-N再次低于0～10mg/L时，取7～15％的 活性污泥转接到新的所述富集培养基中，重复富集驯化3～6次，得到目标污泥， 并通过DGGE指纹图谱检测氨氧化基因丰度，分子角度确定污泥的有效性；