[发明专利]多肽偶联物与表皮干细胞外泌体的组合在药品和化妆品中的应用

说明书

本发明涉及多肽偶联物与表皮干细胞外泌体的组合在药品和化妆品中的应用，本发明通过从表皮干细胞中提取并获得外泌体，将外泌体和多肽偶联物制备具有抑制黑色素合成的组合物，同时通过皮肤实验证明了具有祛斑和防治痤疮的效果。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽偶联物与表皮干细胞外泌体的组合在药品和化妆品中的应用。

背景技术

外泌体(exosome)是细胞经过“内吞一融合一外排”等一系列调控过程形成并可分泌的分子直径为40～100nm的亚细胞双层膜囊泡。透射电子显微镜下外泌体呈扁平状或球状，在蔗糖溶液中的密度为1.13～1.19g／mL，其密度与细胞来源相关，并随蛋白含量而改变。外泌体内不含有DNA片段，但含有与其来源细胞相类似的细胞因子、生长因子等蛋白质，以及脂质、编码或非编码RNA等生物活性物质，在调控细胞生理功能方面具有重要作用。外泌体的质膜含有丰富的胆固醇、鞘磷脂、神经酰胺、脂筏及磷脂酰丝氨酸；外泌体不仅可以保护这些生物活性物质在细胞外环境中不被降解和稀释，也可以促进这些物质通过组织液或血液的远距离输送，同时外泌体膜上特异性的表面配体允许它与受体细胞高效率结合。

目前有研究发现，外泌体与变态反应性疾病、黑素瘤、自身免疫性疾病及伤口愈合等皮肤相关的疾病有很大关系，在各种生理和病理过程中发挥着重要的生物学作用。黑素瘤通过外泌体能招募骨髓衍生细胞，诱发预转移小生境的形成。还能增强肺血管内皮通透性和促进小鼠肺转移的发生。有研究证实黑素瘤来源的外泌体很快进入间充质基质细胞，并促进其增殖和迁移。这种作用可能有利于在肿瘤微环境中募集到更多的基质细胞，从而更好地支持肿瘤的生长和转移。

外泌体促进伤口愈合上，已有大量报道证实间充质干细胞分泌的外泌体（MSC-Exo）具有再生功能。学者在研究MSC来源的上清液（CM）对心脏的保护作用时，发现是 CM 中大于 1000 ku 的组分介导了主要的保护作用，进而分离出一种称为外泌体的微小囊泡。有研究发现 MSC-Exo 可以激活蛋白激酶 B(Akt)、细胞外调节蛋白激酶（ERK）等信号级联通路，提高肝细胞生长因子（ HGF）、胰岛素样生长因子（IGF）-1 及神经生长因子（ NGF）等因子的表达量，来促进伤口愈合。也有研究发现 MSC-Exo 通过激活 Wnt4/β-Catenin 通路加快血管新生，紧接着该课题组进一步通过皮下注射 MSC-Exo，显著促进烫伤后皮肤的恢复及再生。

近期还有专家指出在紫外线辐射下表皮角质形成细胞分泌的外泌体，可通过miRNA 调控黑素细胞相关基因的表达，增强酪氨酸酶的活性，促进黑素生成，为色素性疾病的治疗及防晒用品的开发提供新的方向。

CN108451887A中提供了一种用于皮肤护理的组合物，所述组合物包含人脐带间充质干细胞源外泌体、表皮生长因子和透明质酸钠，通过发挥三者的协同作用，用于人面部或眼部的保湿、修复、抗皱和/或美白中的作用。

申请人在CN110680928A中也公开了一种用于美白的化妆品，提供了一种多肽偶联物，具有一定的抑制黑色素效果，但是还有一定的改进空间，在组合利用上还有较大的利用价值。

但是从已经公开的外泌体用途皮肤化妆品中来看，其一方面研究还不是很充分，另外一方面在化妆品效果上仍有很大的提高空间。

发明内容

本发明提供一种外泌体，更具体的是提供一种小鼠表皮干细胞的外泌体。

本发明的另外一方面，提供一种小鼠表皮干细胞的外泌体的制备方法，主要是采用终浓度为0.5%海藻糖和终浓度为8%的PEG 6000 试剂进行处理后能够高质量的提高外泌体的提取量，具有较好的提取效果。