[发明专利]检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂及其制备方法，试剂包括由样品垫、标记物垫、包被垫、吸收垫依次搭接并贴在底衬卡上，标记物垫为包被有荧光微球标记新冠肺炎病毒S蛋白的玻璃纤维，包被垫为包被有兔抗S蛋白多克隆抗体作为质控线和包被有新冠肺炎病毒S蛋白抗原为检测线的硝酸纤维素膜。本发明提供的检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂，可用于检测感染新冠肺炎病毒后，早期出现的新冠肺炎病毒IgM抗体，也可有效检测出感染中、后期出现的IgG抗体；试剂的特异性强，检测灵敏度高，除了可检测常规的血清、血浆外，还可用于全血和指尖血检测，使用更方便，更利于筛查，可降低医护人员采样操作暴露感染的风险。

技术领域

本发明涉及一种新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂及其制备方法，属于生物技术检测技术领域。

背景技术

2019新型冠状病毒为一种不分节段的单股正链RNA病毒，其具有包膜、颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm，该病毒变异快、宿主多，具有较强的宿主适应性。

各大医疗机构急需明确诊断对抗疫情，其中核酸检测方法和试剂在确诊工作中扮演最重要的角色，是疫情诊断的金标准。但目前核酸检测试剂不仅短缺，而且存在着检出率不高，经常出现假阴性的问题；连续几天进行核酸检测，直到检测3-4次后才能确诊是核酸阳性，而且受PCR实验环境设施的严格要求，具有检测资质的实验室数量有限。据统计，新冠病毒核酸阳性率目前只有30-50％，这些都在影响新型冠状病毒肺炎病人的确诊，成为影响疫情防控的瓶颈问题。专家呼吁开发新的抗体检测试剂，来提高检测率，但对于抗体检测，抗原选择及检测手段是目前要解决的技术难题。

发明内容

(一)要解决的技术问题

为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂，该试剂可准确、有效检测新冠肺炎病毒抗体。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

一种检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂，其包括由样品垫、标记物垫、包被垫、吸收垫依次搭接并贴在底衬卡上，其中，所述标记物垫为包被有荧光微球标记新冠肺炎病毒S蛋白的玻璃纤维，所述包被垫为包被有兔抗S蛋白多克隆抗体作为质控线和包被有新冠肺炎病毒S蛋白抗原为检测线的硝酸纤维素膜。

在一个优选的实施方案中，所述新冠肺炎病毒S蛋白抗原的氨基酸序列SEQ IDNO.1所示。

在一个优选的实施方案中，所述新冠肺炎病毒S蛋白抗原的表达采用的基因序列如SEQ ID NO.2所示。

在一个优选的实施方案中，所述样品垫为含鼠抗人红细胞抗体的处理液进行浸泡处理后的样品垫。

一种检测新冠肺炎病毒抗体的荧光免疫层析试剂的制备方法，其包括如下步骤：

S1、将荧光微球活化后加入新冠肺炎病毒S蛋白进行标记，获得荧光微球标记抗原；

S2、将荧光微球标记抗原，包被在玻璃纤维上，干燥，获得标记物垫；

S3、硝酸纤维素膜上设有质控线和检测线，质控线上包被有兔抗S蛋白多克隆抗体，检测线上包被有新冠肺炎病毒S蛋白，获得包被垫；

S4、将样品垫浸入含有鼠抗人红细胞抗体的处理液中浸泡处理2～5小时，取出烘干；

S5、将样品垫、标记物垫、包被垫、吸收垫依次搭接并贴在底衬卡组成，按包被垫靠近质控线的一端覆盖上吸收垫，靠近检测线的另一端覆盖标记物垫进行贴条，其中，所述新冠肺炎病毒S蛋白的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。