[发明专利]基于血浆外泌体环状RNA的冠心病分子诊断标志物及其应用

说明书

本发明属于分子诊断技术领域，公开了基于血浆外泌体环状RNA的冠心病分子诊断标志物及其应用。利用高通量测序和实时定量PCR实验证明，与健康人群相比，冠心病患者血浆外泌体中环状RNA hsa_circ_0005540的表达水平显著升高，hsa_circ_0005540可以作为冠心病的分子诊断标志物，通过检测受试者血浆外泌体中hsa_circ_0005540的表达水平即可判断受试者是否患有冠心病。本发明提供了可用于冠心病诊断的分子标志物hsa_circ_0005540基因表达产品，及其在制备诊断冠心病工具中的用途。作为一种无创、快速灵敏且低成本的冠心病诊断方法，该分子标志物在临床上具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于分子诊断技术领域，尤其涉及基于血浆外泌体环状RNA的冠心病分子诊断标志物及其应用。

背景技术

目前，冠心病是冠状动脉粥样硬化造成冠状动脉狭窄或阻塞，导致患者发生心肌缺血、缺氧而引起的一种心血管疾病。近年来，冠心病等老年性心血管疾病在我国的发病率和死亡率呈逐年上升趋势，已成为威胁我国公众健康的重要疾病之一。冠心病的发生发展是一个漫长的过程，受年龄、高血压、糖尿病、肥胖和生活方式等多种因素影响。外泌体(exosomes)是细胞主动向胞外分泌的30-120nm囊泡小体，通过运输蛋白质、脂质和核酸等生物活性分子到靶细胞，参与细胞间的信息和物质传递。研究发现，生理或病理状态下的血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁等体液中均存在外泌体。环状RNA(circular RNA，circRNA)是一类具有闭合环状结构的内源性RNA分子，主要由pre-mRNA通过可变剪切加工产生。它广泛存在于各种生物细胞中，具有表达丰度高、结构稳定和组织特异性表达等特征。越来越多的研究表明，circRNA可通过在转录及转录后水平调节基因的表达，参与细胞增殖、分化、自噬和凋亡等多种生物学过程，在各种疾病发生发展过程中发挥重要作用。研究还发现circRNA在疾病诊断方面具有巨大的潜力，有望成为新型的临床分子诊断标志物。最近有研究发现，血液外泌体中含有大量circRNAs(exo-circRNAs)，提示血液外泌体中丰度高、稳定和组织特异性强的exo-circRNAs，具有成为疾病诊断分子标志物的潜力。

目前冠心病的临床诊断存在知晓率低、治疗率低和控制率低的“三低”状况，对疑诊患者缺乏规范化诊断导致冠心病误诊率和漏诊率较高。而理想的早期诊断和干预需要一个灵敏可靠的检测技术手段。目前临床上冠心病诊断的金标准是冠状动脉造影，但它具有费用较高、有创性以及有临床风险等缺点，因此研发一种无创、快速灵敏且低成本的分子诊断方法势在必行。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)目前冠心病的临床诊断存在知晓率低、治疗率低和控制率低，对疑诊患者缺乏规范化诊断导致冠心病误诊率和漏诊率较高。

(2)目前临床上冠心病诊断的金标准是冠状动脉造影，具有费用较高、有创性以及有临床风险等缺点。

解决以上问题及缺陷的难度为：目前临床上对冠心病的诊断缺少一种简易可靠、快速灵敏的诊断方法。而外泌体环状RNA作为生物分子诊断标志物，其取材方便、检测便捷的同时又有较高的灵敏度和特异性，就能解决以上问题。

解决以上问题及缺陷的意义为：本发明的意义在于当现有技术不足时，寻找一种诊断冠心病的外泌体环状RNA作为生物标志物，为冠心病的诊断、预后以及治疗等研究提供有利基础，对提高冠心病人群的知晓率、治疗率和控制率，以及降低冠心病人群的死亡率具有重大意义。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了基于血浆外泌体环状RNA的冠心病分子诊断标志物及其应用。

为实现上述目的，本发明是采用以下技术方案：

本发明提供一种检测hsa_circ_0005540的产品在制备冠心病诊断工具中的用途。