[发明专利]miR-10a介导肿瘤相关成纤维细胞抑制结肠癌肝转移的应用

说明书

本发明提供了miR‑10a介导肿瘤相关成纤维细胞在如下1)‑6)中至少一种功能的产品中的应用，1)抑制肿瘤细胞增殖；2)促进肿瘤细胞凋亡；3)抑制肿瘤细胞迁移；4)抑制肿瘤细胞侵袭；5)抑制肿瘤细胞成球；6)预防和/或治疗肿瘤；所述肿瘤为结肠癌；所述肿瘤细胞为结肠癌细胞；miR‑10a的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明从一个全新的角度认识和了解过表达的miR‑10a在体外对肝成纤维细胞活性的影响，并深入探讨其活性改变对结肠癌细胞在肝脏形成转移灶的影响，以期为结肠癌肝转移的分子机制提供表观遗传学依据，为结肠癌的预防和治疗提供新的思路和靶点。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及miR-10a介导肿瘤相关成纤维细胞抑制结肠癌肝转移的应用。

背景技术

结肠癌(colon cancer)是人类目前最常见的消化道恶性肿瘤之一，我国发生率约为 31.39/10万，随着人们生活习惯食物谱的改变，其发病率呈明显的上升趋势。结肠癌的基本治疗方法是手术切除，对高危II期和III/IV期结肠癌患者施行辅助化疗的方案。多数早期结肠患者能够得到成功外科切除，但是对于II/III期患者来说，往往出现复发，这与转移密切相关。约30％的患者在首次确诊时即伴有不同程度的肝转移，约20％的患者在肿瘤进展过程中会发生异时性肝转移。转移是结肠癌患者致死的主要原因，但迄今仍然缺乏检测和预防潜在转移的有效方法，故我们需进一步研究结肠癌的转移机制，寻找可预测性的标记物和治疗靶点。

肿瘤的转移是一个多阶段、多步骤的复杂过程，受到肿瘤微环境的密切影响。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是肿瘤细胞和相邻正常组织之间的部位，主要由细胞外基质、可溶性分子和肿瘤相关成纤维细胞(tumor associated fibroblasts,TAFs)、免疫细胞、内皮细胞、周细胞及骨髓来源细胞等基质细胞组成，可通过诱导肿瘤血管和淋巴管生成、调节免疫系统和重塑细胞外基质促进肿瘤转移。TAFs是TME中主要细胞成分，其可通过分泌多种生长因子、细胞因子、趋化因子和降解细胞外基质蛋白促进肿瘤的发生发展及转移。例如，Kojima等人发现，与口腔鳞癌细胞共培养的肿瘤相关成纤维细胞通过分泌大量CCL7，增强口腔鳞癌细胞的迁移和侵袭能力；Lederle等人在前列腺癌的研究中发现，TAFs通过分泌CXCL1促进自身的增殖及迁移能力，从而增加TAFs促进肿瘤细胞生长、血管生成及巨噬细胞浸润的能力。然而在结直肠癌中，特别是结直肠癌肝转移过程中，癌细胞与成纤维细胞之间的相互作用尚缺少系统研究，这种相互作用是否以及如何影响结直肠癌肝转移仍不清楚。

微小RNA(microRNA,miRNA)是一种约22个碱基的非编码单链小RNA分子，通过部分或完全碱基配对识别靶基因来调节靶基因的表达，是细胞发育、凋亡和代谢等多种维持生命必需的生物学的功能调节因子，在炎症相关肿瘤发生和转移过程当中亦发挥重要作用。近期研究发现miRNA可通过靶向不同信号通路和代谢基质调控TAFs的活性，从而参与肿瘤细胞与TAFs之间的复杂网络信号，影响肿瘤进展。例如：在口腔癌TAFs 中miR-335上调使COX-2和PGE分泌水平增加，并通过抑制癌细胞中PTEN基因表达抑制其迁移。在肺癌TAFs中miR-1下调促进SDF1分泌，SDF1通过CXCR4激活NF-κB 和Bcl-xL信号通路促进肺癌细胞增殖和顺铂耐药。表明miRNA有望成为治疗靶点。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供miR-10a介导肿瘤相关成纤维细胞抑制结肠癌肝转移的应用。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了miR-10a介导肿瘤相关成纤维细胞在如下1)-6)中至少一种功能的产品中的应用，

1)抑制肿瘤细胞增殖；

2)促进肿瘤细胞凋亡；

3)抑制肿瘤细胞迁移；