[发明专利]一种动物胎盘转移因子的制备方法

说明书

本发明属于生物制药技术领域，提出了一种动物胎盘转移因子的制备方法，包括以下步骤：将动物胎盘与水混合，匀浆后进行细胞破碎得到胎盘组织；将胎盘组织用酸调节pH至3.5～4.5，得到调酸后的胎盘组织液；将胎盘组织液在‑20℃、‑40℃、‑60℃下分阶冻融，每个温度梯度的冷冻时间16～24h，冷冻完成后，在20～25℃水浴解冻，每个温度梯度冻融1次，得到冻融后的胎盘组织液，将胎盘组织液离心，收集上清液；将上清液用5μm～0.22μm的滤膜分级过滤，收集微滤透过物，得到动物胎盘转移因子。通过上述技术方案，解决了现有技术中提取的胎盘有效活性物质分子量大以及提取方法的提取效率低的问题。

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，涉及一种动物胎盘转移因子的制备方法。

背景技术

我国利用动物的各种器官、组织及代谢产物进行治病、防病和医疗保健的历史悠久，历代本草也都记录了胎盘在医疗保健上的作用。无论是根据祖国医学的长期实践经验，还是从现代科学的研究结果看，胎盘及其提纯物质(或制剂)具有调节免疫、抗氧化、抗疲劳和延缓衰老等保健作用，并正在被开发应用。

家畜脏器(如胎盘)中含有多种多样具有生物活性的物质，在许多行业有着广泛的用途和独特的功效。随着生物技术的不断进步与发展，生物制药、生化产品、生物农业、生物食品、生物活性化妆品以及生物源性保健产品的兴起，均需大量生物脏器及其提取物作为主要原料或重要辅料，为脏器资源加工提供了巨大的机遇与市场。

目前，已有多种利用胎盘提取有效活性物质的专利，这些专利获取胎盘提取物的方法主要有以下几种：(1)直接提取:：将胎盘组织经匀浆后加提取液提取；(2)超临界CO₂萃取：将胎盘组织冻干、粉碎、超临界萃取后，萃取物匀浆、离心，冻干离心液；(3)酶辅助提取：胎盘经1-2种蛋白酶适度酶解后，离心、冻干离心液。采用以上这些方法制备的胎盘提取物中有效活性物质以大分子蛋白为主，分子量大，人体吸收率低，而且以上方法提取效率低。因此，发明一种提取效率高的分子量小的动物胎盘转移因子的制备方法，很有必要。

发明内容

本发明提出一种动物胎盘转移因子的制备方法，解决了现有技术提取的胎盘有效活性物质分子量大以及提取方法的提取效率低的问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种动物胎盘转移因子的制备方法，包括以下步骤：

胎盘组织液的制备、胎盘组织液的分阶冻融、离心、过滤，得到动物胎盘转移因子，

所述分阶冻融具体为将胎盘组织液在-20℃、-40℃、-60℃下分阶冻融，每个温度梯度的冷冻时间16～24h，冷冻完成后，解冻，每个温度梯度冻融1次，得到冻融后的胎盘组织液。

作为进一步的技术方案，所述胎盘组织液的制备具体为将动物胎盘与水混合，匀浆后进行细胞破碎，用酸调节pH至3.5～4.5，得到调酸后的胎盘组织液。

作为进一步的技术方案，所述离心为在4℃、6000r/min的条件下离心20min，所述过滤为用5μm～0.22μm的滤膜分级过滤。

作为进一步的技术方案，所述动物胎盘与水的质量体积比为1：(3～5)，匀浆时间为5～10min。

作为进一步的技术方案，动物胎盘与水混合前先将动物胎盘绞碎。

作为进一步的技术方案，所述酸为冰乙酸或盐酸。

作为进一步的技术方案，过滤之后还包括以下步骤：将动物胎盘转移因子调节pH至4.0～6.0，注射用水配液，除菌、灌装，得到动物胎盘转移因子注射液。

作为进一步的技术方案，所述除菌为采用0.1μm的除菌过滤器除菌，得到的动物胎盘转移因子注射液中小分子肽含量≥2.0mg/mL。