[发明专利]一种小型猪急性肾损伤（AKI）模型的构建方法

说明书

本发明涉及一种小型猪急性肾损伤(AKI)模型的构建方法。本发明首次采用顺铂剂量为3.8‑4.0mg/kg，选取雄性小型巴马猪作为建立模型的对象，通过耳后静脉注射的方式，成功构建小型猪急性肾损伤(AKI)模型。本发明首次成功构建了小型猪急性肾损伤(AKI)模型，解决了现有技术中啮齿类动物模型在遗传学、肾脏解剖形态、生理学以及给药方式、致病机理等方面与人类急性肾损伤相差较大的问题，为人类急性肾损伤的研究提供了更为接近和可靠的药物临床前研究的动物模型，为更早地预防及治疗临床患者顺铂‑AKI的发生提供依据。

技术领域

本申请涉及一种小型猪急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)模型的构建方法，属于动物模型技术领域。

背景技术

顺铂是一种高效的抗肿瘤药物，目前主要用于治疗膀胱癌、宫颈癌、非小细胞肺癌等恶性肿瘤。但是由于肾毒性、神经毒性、耳毒性和致畸性等严重的副作用，顺铂的临床应用受到限制。肾毒性是其中的主要限制因素，约25％-35％接受单剂量顺铂治疗的病人出现肾功能受损，表现为肾小球滤过减少20-40％、血清肌酐和尿素氮浓度升高等急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)表现，而目前的肾保护措施在接受顺铂化疗的患者中并不令人满意。AKI由于病因复杂，缺乏有效治疗手段，导致医疗花费大，病死率高，是严重危害健康的重要疾病。所以，通过顺铂-AKI模型寻找可能的保护措施对于减轻顺铂导致的AKI至关重要。

目前，顺铂-AKI模型多采用啮齿类动物(大鼠、小鼠)进行构建，但是由于啮齿类动物与人类在遗传、体型、行为、寿命等方面存在着明显差异，因此基于啮齿类动物所构建的肾脏疾病模型并不能很好地模拟人类肾脏疾病，由此，在寻求相应人类肾脏疾病的治疗手段和保护措施的过程中，该种啮齿类动物模型并不能很好的反映其在人体的有效性。

此外，啮齿类动物的顺铂-AKI模型通常采用腹腔注射进行构建，而该种腹腔注射的方式与临床上顺铂给药进行人体治疗的方式存在着明显地不同，并且啮齿类动物的顺铂-AKI模型无法实现对肾脏以外的其他器官以及全身反应进行观察，因此其也不能很好地模拟顺铂所致AKI的发病机制。

由此，目前亟需一种在遗传学、肾脏解剖形态、生理学以及给药方式、致病机理等方面与人类更加接近的药物临床前研究的急性肾损伤(AKI)模型。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的上述技术问题，提供一种小型猪急性肾损伤(AKI)模型的构建方法，本发明首次采用小型猪作为急性肾损伤(AKI)动物模型的构建载体，采用耳后静脉注射的方式，以顺铂剂量为3.8-4.0mg/kg，成功构建了顺铂-AKI小型猪模型，解决了传统啮齿类动物模型给药方式以及遗传性与人类存在较大差异的难题，为人类急性肾损伤的研究提供了更为可靠的、更为接近的药物临床前研究的动物模型，为更早地预防及治疗临床患者顺铂-AKI的发生提供依据。

为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：

一种小型猪急性肾损伤(AKI)模型的构建方法，包括如下步骤：

(1)将顺铂用生理盐水配置为1mg/ml的顺铂溶液，配置后放于摇床上50r/min转速室温摇晃30min，然后经0.22μm滤器过滤去除杂质和细菌待用；

(2)选取5-6月龄、体重15-16kg的实验用雄性小型猪作为建立模型的对象；

(3)称量小型猪体重，然后经异氟烷吸入麻醉方法麻醉小型猪；

(4)使用注射器吸取顺铂溶液，以3.8-4.0mg/kg顺铂剂量，对小型猪经静脉缓慢注射；

(5)注射完成后待小型猪苏醒，将其回笼正常饲养；

(6)3天后即可获得小型猪急性肾损伤(AKI)模型。

进一步优选地，步骤(1)中，顺铂溶液宜现配现用，需锡纸包裹避光常温保存。