[发明专利]一种用于冷冻电镜成像用样品台

说明书

本发明公开了一种用于冷冻电镜成像用样品台，包括底座和可拆卸的填充部件，所述底座为圆盘状结构，所述底座上设有凸沿，所述凸沿与底座围成用于容置样品的空腔，所述填充部件能够在高压冷冻时对所述凸沿的外侧壁与底座形成的阶梯结构进行填充，并在预减薄过程中取下。本发明可以容纳加载高端冷冻透射电镜上样环，并可稳定地被固定在上样环和上样底座之间，并可以被电镜Autoloader中的机械手抓取，并放入镜筒中进行成像。因此，本发明提供的样品台可应用于Autoloader的冷冻电镜上。

技术领域

本发明涉及生物样品检测领域，特别涉及一种用于冷冻电镜成像用样品台。

背景技术

近年来，得益于冷冻电子断层成像技术(cryo-electron tomography，cryo-ET)的发展，原位结构生物学研究发展迅速，其研究对象的状态更接近生理条件，解析结构的分辨率也在不断提高。其最终目的是原位解析生物大分子及分子机器的结构，从而在分子、细胞器、细胞等不同层次上阐述生命活动的本质。

冷冻电子断层成像技术一般要求样品厚度在500nm以下，否则成像时会产生过多的非弹性散射电子使得照片信噪比严重下降，后续图像处理难以进行。由于绝大部分细胞和组织样品的厚度远超500nm，因此这类样品采取的技术路线是冷冻固定——冷冻聚焦离子束(Cryo-FIB)减薄——冷冻电子断层成像。通常，一些小细胞通过快速冷冻的方式，冷冻固定于电镜专用的载网之上，然后通过冷冻聚焦离子束减薄后进行冷冻电镜成像。但是快速冷冻的冷冻深度最多在十几个微米，对厚度动辄在几十到几百微米的组织和一些大尺度细胞而言，单纯的快速冷冻无法使样品结构得到良好的固定，因此必须通过高压冷冻的技术。高压冷冻后产生的样品块经过冷冻切片机的修块，再通过冷冻聚焦离子束减薄到几百纳米，最终送入冷冻电镜进行成像。

为了提高成像分辨率，人们使用带有Autoloader的冷冻电镜，如FEI Titan Kros进行成像，这类电镜分辨率高，可以得到更加真实清晰的原位结构。然而，电镜所用的样品承载工具是载网，高压冷冻所用的样品承载工具是样品台，Autoloader无法装载样品台，因此，现有的样品台无法应用到Autoloader的冷冻电镜上。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于冷冻电镜成像用样品台，以解决现有的样品台无法应用到Autoloader的冷冻电镜上的问题。

根据本发明的实施例，提供了一种用于冷冻电镜成像用样品台，包括底座和可拆卸的填充部件，所述底座为圆盘状结构，所述底座上设有凸沿，所述凸沿与底座围成用于容置样品的空腔，所述填充部件能够在高压冷冻时对所述凸沿的外侧壁与底座形成的阶梯结构进行填充，并在预减薄过程中取下。

具体地，所述凸沿和填充部件均为环状结构，所述填充部件能够套设在所述凸沿的外侧壁上。

具体地，所述凸沿的中心与所述底座的中心相重合。

具体地，所述填充部件的高度与所述凸沿外侧壁的高度相同。

具体地，所述底座和填充部件采用导热的金属材料制成。

本发明实施例提供了一种用于冷冻电镜成像用样品台，可以容纳加载高端冷冻透射电镜上样环，并可稳定地被固定在上样环和上样底座之间，并可以被电镜Autoloader中的机械手抓取，并放入镜筒中进行成像。因此，本发明提供的样品台可应用于Autoloader的冷冻电镜上。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例提供的一种冷冻电镜成像用样品台的结构图；

图2为底座的结构图；