[发明专利]一种同时定量检测新冠病毒的IgG和IgM含量的检测纸及其方法

权利要求书

1.一种同时定量检测新冠病毒的IgG和IgM含量的检测纸，其特征在于：所述检测纸包括底板(4)以及沿所述底板(4)长度方向且顺次粘覆于底板(4)上的吸水纸(1)、硝酸纤维素膜(2)、结合垫(8)、样品垫(3)，依次序所述吸水纸(1)、硝酸纤维素膜(2)、结合垫(8)以及样品垫(3)之间相邻部位相接触且部分重叠，其中，所述硝酸纤维素膜(2)粘覆于所述底板(4)的中间部位，所述硝酸纤维素膜(2)上铺设有相互间隔且喷涂有抗人IgM单克隆抗体的第一检测带(7)、喷涂有抗人IgG单克隆抗体的第二检测带(6)以及喷涂有抗新冠病毒2019-nCoV特异性蛋白的单克隆抗体的质控带(8)，所述结合垫(8)上喷涂有稀土离子的纳米微球标记的新冠病毒2019-nCoV的特异性蛋白，所述质控带(8)、第一检测带(7)以及第二检测带(6)平行设置；

所述结合垫(8)位于硝酸纤维素膜(2)的上方，且所述结合垫(8)与硝酸纤维素膜(2)相重叠的部分在底板(4)长度方向的长度为2mm；所述样品垫(3)设于所述结合垫(8)的上方，且所述样品垫(3)与结合垫(8)相重叠的部分在底板(4)长度方向的长度为2mm；所述吸水纸(1)设于硝酸纤维素膜(2)的上方，且所述吸水纸(1)与硝酸纤维素膜(2)相重叠的部分在底板(4)长度方向的长度为2mm。

所述检测纸外包裹有外壳，所述外壳包括底座和卡盖(9)，所述卡盖(9)上开设有用于露出所述检测纸的局部区域观察口(10)和加样口(11)；其中，所述加样口(11)设于所述样品垫(3)上方以露出部分或全部样品垫(3)，所述观察口(10)设于硝酸纤维素膜(2)上方以露出第一检测带(7)、第二检测带(6)以及质控带(8)。

2.根据权利要求1所述的一种同时定量检测新冠病毒的IgG和IgM含量的检测纸，其特征在于：所述第一检测带(7)与结合垫(8)相邻，且相隔距离为0.4cm或0.5cm；所述第二检测带(6)位于第一检测带(7)和质控带(8)之间，所述第二检测带(6)与第一检测带(7)相隔距离为0.4cm或0.5cm，所述第二检测带(6)与质控带(8)相隔距离为0.4cm或0.5cm。

3.根据权利要求1所述的一种同时定量检测新冠病毒的IgG和IgM含量的检测纸，其特征在于：所述底座为塑料底座，所述卡盖(9)为塑料卡盖。

4.一种同时定量检测新冠病毒的IgG和IgM含量的检测纸的制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：

1)抗原的预处理：选用商品化的新冠病毒2019-nCoV的特异性蛋白，用0.05mol/L，pH为7.2-7.6的磷酸盐缓冲液在4℃下透析过夜；所述新冠病毒2019-nCoV的特异性蛋白为N蛋白或者S蛋白；

2)标记抗原的制备：在纳米微球溶液中加入终浓度为20mmol的碳二亚胺和预处理过的2019-nCoV的特异性蛋白，所述微球质量：抗体质量为50:1，室温反应2小时，离心，去除上清液后，加入样品稀释液至微球浓度为1.0mg/ml，待用，用定量喷膜仪以3ul/cm-5ul/cm的量将制备好的微球喷涂于聚酯膜形成的结合垫(8)上，避光的条件下于35-38℃烘干1小时，加入干燥剂封存备用；所述样品稀释液为含有1％BSA的0.05mol/L，pH为7.2的磷酸盐缓冲液；

3)硝酸纤维素膜(2)的制备：使用含1％蔗糖的0.02mol/L，pH为7.4的磷酸盐缓冲液，分别将抗人IgM单克隆抗体、抗人IgG单克隆抗体以及抗新冠病毒2019-nCoV的特异性蛋白的单克隆抗体稀释到1mg/ml的浓度，使用定量喷膜仪以1ul/cm的量将三者间隔喷于硝酸纤维素膜(2)上，35-38℃烘干1h，加入干燥剂封存备用；

4)试纸条的组装：在底板(4)中间先铺设硝酸纤维素膜(2)，然后在与质控带(8)相临近的一端铺吸水纸(1)，使吸水纸(1)与硝酸纤维素膜(2)部分重叠；在与第二检测带(6)相临近的一端铺结合垫(8)，使硝酸纤维素膜(2)与结合垫(8)，最后贴样品垫(3)，用斩切机按0.4cm宽度斩切后，装入外壳中。