[发明专利]一种靶向于CD22分子的嵌合抗原受体

说明书

本发明公开了一种靶向于CD22分子的嵌合抗原受体，属于细胞免疫治疗技术领域。所述靶向于CD22分子的嵌合抗原受体，包括依次连接的前导肽、靶向于CD22分子的纳米抗体重链可变区、CD8α链铰链区、CD8α链跨膜区、CD28分子胞内段、4‑1BB分子胞内段和CD3ζ链,所述靶向于CD22分子的纳米抗体重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明采用靶向于CD22分子的纳米抗体作为受体的特异性识别结构组分，能够特异性地抑制、杀伤以CD22分子作为标志物的疾病。

技术领域

本发明涉及一种靶向于CD22分子的嵌合抗原受体，属于细胞免疫治疗技术领域。

背景技术

近些年来，免疫学领域中对于转化医学的研究越来越多，尤其是肿瘤免疫。肿瘤免疫治疗中应用比较广泛的是CAR-T细胞免疫治疗策略。在90年代早期，这种免疫治疗策略在转化医学中就获得了好的效果。CAR-T细胞经历了一代、二代到三代的转变。通过这种技术和设计上的革新，逐步对治疗过程中细胞毒作用的活化、杀伤信号的持久进行优化。靶向于CD22分子的CAR-T细胞应用较为广泛，尤其是治疗B淋巴细胞瘤等血液肿瘤。正常机体内的T细胞被有效刺激并发挥免疫学功能需要多重信号的调控，主要包括T细胞受体(TCR)与MHC-抗原肽复合物的识别作为第一信号、T细胞表面的共刺激分子识别活化作为第二信号，甚至还需要细胞因子参与形成第三信号。这种嵌合抗原受体主要是将T细胞刺激和活化的过程所需的蛋白分子进行人工的串联整合，从而促进T细胞的活化和特异性杀伤。CAR-T细胞的特异性杀伤主要是前端的抗体分子部分的识别和结合。目前使用较为广泛的是基于人或其他种属的单克隆抗体单链可变区(Single chain Fv,ScFv)对靶蛋白的特异性识别。但存在如下缺陷：在ScFv与纳米抗体亲和力相当的基础上，ScFv相对于纳米抗体来讲分子量较大，在分子表达和功能发挥上存在一定的限制。纳米抗体是天然存在的最小的抗体片段。ScFv由其亲本单克隆抗体衍生而来，在活性和稳定性等方面可能存在着一定的不足。

鉴于此，有必要提供一种新的靶向于CD22分子的嵌合抗原受体，以解决现有技术的不足。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种靶向于CD22分子的嵌合抗原受体。本发明的靶向于CD22分子的嵌合抗原受体,采用靶向于CD22分子的纳米抗体作为受体的特异性识别结构组分，能够特异性地抑制、杀伤以CD22分子作为标志物的疾病，如B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、多毛细胞白血病和急性髓性白血病等。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种靶向于CD22分子的嵌合抗原受体，包括依次连接的前导肽、靶向于CD22分子的纳米抗体重链可变区、CD8α链铰链区、CD8α链跨膜区、CD28分子胞内段、4-1BB分子胞内段和CD3ζ链,所述靶向于CD22分子的纳米抗体重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明的靶向于CD22分子的嵌合抗原受体的原理是：

本发明采用CD22单链抗体作为受体的特异性识别结构组分。该CD22单链抗体来源于羊驼，是羊驼天然存在的一种缺失轻链的抗体分子。该抗体只包含一个重链可变区(Variable domain of heavy chain of heavy chain antibody,VHH)和两个常规的CH2和CH3区，单独克隆并表达出来的重链可变区(VHH)结构与其完整的重链抗体相比，在抗体结构稳定性以及与抗原的结合活性中都是相当的，是目前已知的具有最小蛋白分子量的抗体结构，故称这段重链可变区(VHH)结构为纳米抗体(nanobody，Nb)。相较于现有技术的单克隆抗体单链可变区(Single chain Fv,ScFv)，该CD22单链抗体的重链可变区具有结构更小的优点，在嵌合抗原受体的表达和对T细胞的修饰中均具有优势。

本发明的靶向于CD22分子的嵌合抗原受体的有益效果是：