[发明专利]一种COVID-19核酸检测引物组及COVID-19等温扩增核酸检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种COVID‑19核酸检测引物组及COVID‑19等温扩增核酸检测试剂盒，涉及病毒核酸检测方法技术领域。本发明提供一种COVID‑19的检测试剂盒，利用所述的COVID‑19核酸检测引物组构建检测试剂盒，无需进行核酸提取，通过特异性的显色反应，在等温条件下，1小时内可准确、快速检测COVID‑19病毒，方便直观地进行筛查COVID‑19病毒感染情况，具有广阔的前景和较大的社会效益。

技术领域

本发明涉及病毒核酸检测方法技术领域，尤其涉及一种COVID-19核酸检测引物组，以及一种COVID-19等温扩增核酸检测试剂盒。

背景技术

2019新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株，2020年2 月11日被WHO世界卫生组织命名为COVID-19。COVID-19所引起的肺炎疾病已成为全球性的公共卫生问题，严重危害人类安全和健康。

实时荧光RT-PCR检测COVID-19病毒核酸已成为诊断COVID-19的标准诊断方法，但存在局限性，假阴率较高。因此一种具有免核酸提取，缩短检测时长，防止二次污染等优点的准确、可视化快速鉴定出大量感染者和无症状携带者的试剂盒，实现COVID-19大量感染者和无症状携带者的快速筛查，对防止病毒传播，保证患者得到及时治疗具有重大意义。

发明内容

为提高COVID-19病毒的准确、快速筛查，本发明的第一目的是提供 COVID-19病毒的N基因核酸检测引物组，实现对COVID-19的检测。

本发明的第二目的在于提供一种COVID-19的检测试剂盒，对鼻咽拭子样本免核酸提取，利用N基因核酸检测引物组，实现可视化COVID-19快速检测。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。

本发明提供的四种COVID-19病毒的检测引物组，根据目前发布的新型冠状病毒的序列，(GenBank:MN908947.3)全长为29903bp，通过对其基因序列blast之后筛选出特异性序列设计环介导等温扩增引物，应用Primer Explorer 软件设计COVID-19病毒N端特异性引物组，利用逆转录等温扩增技术扩增靶基因的特定区域，从分子水平上实现快速检测，对仪器要求低，可通过肉眼观察检测结果，适合现场、基层的快速检测COVID-19病毒，方便筛查COVID-19 病毒感染者。

第一方面，本发明提供一种COVID-19核酸检测引物组，包括一对外引物 F3-1和B3-1、一对内引物FIP-1和BIP-1、以及一对环引物LF-1、LB-1；

所述F3-1、B3-1、FIP-1、BIP-1、LF-1、LB-1的核苷酸序列SEQ ID No如下：

F3-1：TGGACCCCAAAATCAGCG；

B3-1：GGAACGCCTTGTCCTCGA；

FIP-1：CCACTGCGTTCTCCATTCTGGT-AAATGCACCCCGCATTACG；

BIP-1：GCGATCAAAACAACGTCGGCC-TCCTTGCCATGTTGAGTGAG；

LF-1：CCAGTTGAATCTGAGGGTCCAC；

LB-1：TGCGTCTTGGTTCACCGC。

第二方面，本发明提供一种COVID-19核酸检测引物组，包括一对外引物 F3-2和B3-2、一对内引物FIP-2和BIP-2、以及一对环引物LF-2、LB-2；

所述F3-2、B3-2、FIP-2、BIP-2、LF-2、LB-2的核苷酸序列SEQ ID No如下：

F3-2：TGGACCCCAAAATCAGCG；