[发明专利]一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂、装置和制备方法在审
申请号: | 202010265981.8 | 申请日: | 2020-04-07 |
公开(公告)号: | CN111389053A | 公开(公告)日: | 2020-07-10 |
发明(设计)人: | 柳家鹏 | 申请(专利权)人: | 柳家鹏 |
主分类号: | B01D15/26 | 分类号: | B01D15/26;C07K1/14;C07K16/00 |
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地址: | 100102 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 杂交瘤 细胞 培养液 小鼠 免疫 吸附剂 装置 制备 方法 | ||
1.一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂,其特征在于,所述的免疫吸附剂包括固相载体和偶联于所述固相载体上的抗鼠二抗。
2.根据权利要求1所述的一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂,其特征在于,所述抗鼠二抗包括羊抗鼠二抗或兔抗鼠二抗。
3.根据权利要求1所述的一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂,其特征在于,所述的固相载体为纳米颗粒。
4.根据权利要求3所述的一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂,其特征在于,所述的纳米颗粒包括磁性纳米颗粒、金纳米粒子、银纳米粒子、金包裹的纳米粒子、银包裹的纳米粒子、纳米棒、纳米线、纳米星、纳米金属氧化物、氧化石墨烯或量子点的一种或几种组合。
5.采用权利要求3或4所述的免疫吸附剂纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将抗鼠二抗偶联到纳米颗粒的表面;
(2)去除未偶联的多余抗体;
(3)封闭纳米颗粒表面空余的位点;
(4)将封闭后的纳米颗粒与杂交瘤细胞培养液进行充分混合;
(5)混合完成后分离出结合有小鼠单抗的纳米颗粒;
(6)从步骤(5)得到的纳米颗粒中解吸出小鼠单抗;
(7)从步骤(6)中分离出含小鼠单抗的上清液,弃掉纳米颗粒,即制得纯化的小鼠单抗;
当所述纳米颗粒仅含磁性纳米颗粒时,纳米颗粒通过外界磁场进行磁分离;
当所述纳米颗粒不含磁性纳米颗粒或不单独含有磁性纳米颗粒时,纳米颗粒通过离心进行分离。
6.根据权利要求1所述的一种纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的免疫吸附剂,其特征在于,所述的固相载体为选自琼脂糖凝胶、纤维素、聚丙烯酰胺凝胶、聚乙烯凝胶、硅胶、壳聚糖或聚苯乙烯-二乙烯苯树脂的一种,每种类型的固相载体包含经改性的含有功能性基团的衍生物。
7.采用权利要求6所述的免疫吸附剂制备的纯化杂交瘤细胞培养液中小鼠单抗的装置,其特征在于,该装置包括柱管和装填于柱管内的固相载体,所述固相填料的上下两端均设有筛板。
8.权利要求7所述装置的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)固相载体的处理;
(2)抗鼠二抗偶联到固相载体上;
(3)封闭固相载体上残留的活性基团;
(4)去除未偶联的抗鼠二抗;
(5)装柱。
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