[发明专利]一种四联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明提供了一种采用法氏囊病毒变异株FJ19(保藏编号为CGMCC NO：19381)的VP2蛋白制备四联灭活疫苗的方法及相应疫苗。疫苗抗原为鸡新城疫La Sota病毒株、禽流感TL18株(保藏编号为CGMCCNO：19382)、法氏囊病毒变异株FJ19的VP2蛋白和I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白。本发明的四联灭活疫苗中VP2蛋白和Hexon蛋白含量高，免疫原性强，甲醛和内毒素含量低，对当前流行的变异株法氏囊病毒FJ19以及I群8b型禽腺病毒具有较好的保护效果，安全性能好，免疫效果确实，可以同时抵抗新城疫病毒、禽流感病毒、变异株法氏囊病毒以及I群8b型禽腺病毒对临床鸡群的感染，免疫剂量小，持续期长，仅一次0.3mL情况下，免疫持续期能长达五个月，至少给鸡群提供70％的保护率。

技术领域

本发明属于生物兽药技术领域，具体涉及一种新型鸡新城疫、传染性法氏囊、禽流感、腺病毒四联灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。以高热、呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征。具有很高的发病率和病死率，是危害全球养禽业最为严重的烈性传染病之一。OIE将其列为A类疫病，是我国《国家中长期动物疫病防治规划》中规定优先防治和重点防范的5种一类动物疫病之一。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告的动物疫病。Lasota为常见的新城疫毒株。禽流感(Avian influenza，AI)是由A型禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)感染禽类引起的一类传染病，广泛发生于世界各地，并且经常变异，对人类和养禽业危害很大。禽流感H9亚型数与低致病性禽流感，在养殖场的发病率比较高，发病症状不太明显，但对鸡肠道和输卵管等影响非常大。

鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease，IBD)是由传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus，IBDV)引起的一种危害青年鸡的烈性、高度接触性、病毒性传染病，主要侵害鸡法氏囊。传染性法氏囊病(IBD)是最为重要的免疫抑制性疾病之一，导致感染鸡较高的发病率和病死率。在过去的几十年中，我国临床流行的法氏囊以超强毒(vvIBDV)和中等毒力的法氏囊病毒为主，传染性法氏囊病毒(IBDV)变异株却从未引起大家的重视。目前使用的IBD疫苗包括中等毒力的弱毒苗、全病毒灭活疫苗以及基因工程疫苗，但在有的地区免疫过IBD疫苗的鸡群中仍然有IBD的发生，提示IBDV 的感染和传播对我国IBD的防控仍然构成威胁。该病多发生在白羽肉鸡、817 肉鸡；一年四季均可发生，以4-7月份多发；3-7周龄易感，最小可见16天鸡发病，感染途径包括消化道、呼吸道、眼结膜等，也可接触传播，其他可通过如饮水器具、食槽、尘土、人员、昆虫、运输车辆间接传播，带毒和发病鸡为主要传染源。传统的疫苗不能对流行的变异株病毒提供保护，同时使用传染性法氏囊病的活疫苗对养殖场地造成持续性的污染，给养殖场带来生物安全风险。研制一种生产成本低、生产效率高以及疫苗免疫效果好的针对IBDV 变异株FJ19的亚单位灭活疫苗对目前临床防控IBD具有重要的现实意义。

Ⅰ群禽腺病毒血清8b型是一种高致病性病原，2013年以来，在我国多个省份流行，导致大量家禽死亡，主要病变表现为肝脏出血。对该病进行流行病学调查发现，该病在我国鸡群中发病率较高，尤其对雏鸡致病严重，主要发生于雏鸡，病雏生长受阻、羽毛蓬乱、蹲伏。多于48h内死亡或逐渐康复。鸡群发病后会突现3～5d的死亡高峰。死亡率低，可能至10％，个别可达30％。有时病程也可持续2～3d。由于目前临床无批准的禽腺病毒疫苗，禽腺病毒的流行给养殖业带来巨大的损失。养殖场为减少成本投入和避免对鸡群的注射应激，急需安全高效和便于投放的多联疫苗，来应对不断变化的疫病防控形势。

发明内容

本发明针对上述现有技术的不足，本发明的一方面提供了一种四联灭活疫苗。抗原为鸡新城疫La Sota病毒株、H9亚型禽流感TL18株、法氏囊病毒变异株FJ19的VP2蛋白和I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白。