[发明专利]血液分离富集白细胞、干细胞和/或病原体的方法及装置

说明书

本发明提供了一种血液分离富集白细胞、干细胞和/或病原体的方法及装置，涉及细胞采集提取分离检测诊断领域；所述方法包括如下步骤：通过去白细胞过滤器对血液进行过滤，去白细胞过滤器将血液过滤完成后，去白细胞过滤器的子袋与去白细胞过滤器的滤器进行分离；去白细胞过滤器的滤器与去白细胞过滤器的子袋分离后的离断处与含有冲洗液的PVC血袋和含有平衡液的PVC血袋进行无菌接驳；无菌接驳后，去白细胞过滤器的滤器通过含有冲洗液的PVC血袋和含有平衡液的PVC血袋进行反向冲洗，最终分离并富集得到白细胞、干细胞和/或病原体。相比现有技术，本发明不仅能够在血液中高效的提取血液中的白细胞、干细胞和/或病原体，还能够减少污染，降低成本。

技术领域

本发明涉及细胞采集提取分离检测诊断技术领域，具体而言，涉及一种血液分离富集白细胞、干细胞和/或病原体的方法及装置。

背景技术

外周血(脐血)中的白细胞包括分叶核和单个核细胞，分离富集不同种类的外周血白细胞及脐血干细胞是免疫学研究的最常用基础细胞原材料，标准化数量及质量的细胞获取是保证科研及临床应用的关键环节。正常人的外周血白细胞多数由志愿者捐献，或无偿献血者捐献，离心将血浆与红细胞之间的白膜层(以白细胞、血小板为主)，通过手工分离获得。有些血站采集血液时使用连接有去白细胞滤器的两联或多联血袋血袋，即采集血液后过滤，完成过滤后将去白细胞滤器连同母袋一般情况丢弃按医疗废物处理。去白细胞滤器中的白细胞是可以回收加以利用。但是实验室手工获取的方法效率不高，也有一体化产品设计，使用含有白蛋白的大量回冲液，合成组装、生产包装灭菌工艺复杂且成本高等限制了方法的实际应用。自体白细胞存储技术使用自身捐献的血液，脐血采集都是为了获得白细胞中的单个核细胞(PBMC)，目前应用单一采血袋，分装试管，应用Ficoll分离液，实验室手工分离提取。此外，对于大多数外来病原体感染的机体都有血行转移可能，病原体会短时间或长时间存在外周血中，从一定量的外周血中分离富集病原体也是明确诊断的关键。

现有技术中外周血(脐血)中白细胞、干细胞及病原体等提取效率不高，活性易损、操作烦琐、费工费料、容易污染等诸多不足。目前有采用离心法手工进行分离提取的，但对技术人员要求高，终产品体积大，费工费时费成本。也有采用的是白膜分离技术，但回收效率不足50％。

发明内容

本发明解决的问题是，现有技术回收效率低，活性易损、操作烦琐、费工费料、容易污染中的一个或一个以上的问题。

为解决上述问题，本发明提供一种血液分离富集白细胞、干细胞和/或病原体的方法，包括如下步骤：通过去白细胞过滤器对血液进行过滤，所述去白细胞过滤器将所述血液过滤完成后，所述去白细胞过滤器的子袋与所述去白细胞过滤器的滤器进行分离；

所述去白细胞过滤器的滤器与所述去白细胞过滤器的子袋分离后的离断处与含有冲洗液的PVC血袋和含有平衡液的PVC血袋进行无菌接驳；

无菌接驳后，所述去白细胞过滤器的滤器通过所述含有冲洗液的PVC血袋和所述含有平衡液的PVC血袋进行反向冲洗，最终分离并富集得到白细胞、干细胞和/或病原体；

所述含有冲洗液的PVC血袋中的冲洗液的组分包括，甘氨酸、葡萄糖、EDTA和纯化水；所述含有平衡液的PVC血袋中的平衡液的组分包括，氯化钠和/或磷酸氢二钠和纯化水。

进一步地，所述冲洗液的各组分的质量百分比为：EDTA0.1％-1.0％，甘氨0.5％-3％，葡萄糖0.2％-1.5％；余量为纯化水。

进一步地，所述平衡液的各组分的质量百分比为：氯化钠1.25-4.5％和/或磷酸氢二钠0.4-1.2％，余量为纯化水。

进一步地，在所述通过去白细胞过滤器对血液进行过滤前，还包括如下步骤：使用所述去白细胞过滤器进行血液采集；所述去白细胞过滤器采集所述血液完毕后，静置第一时间。