[发明专利]尿液miR-548q在多发性骨髓瘤疾病中的应用

说明书

本发明提供一种尿液miR‑548q的应用，具体为尿液miR‑548q在制备用于多发性骨髓瘤相关检测制剂中的应用。本发明通过研究证实，与正常对照组相比，miR‑548q在多发性骨髓瘤组表达降低，可用于多发性骨髓瘤相关的检测、监测及辅助诊断。本发明发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测尿液miR‑548q。

技术领域

本发明涉及尿液miR-548q的新用途，具体涉及尿液miR-548q在制备用于多发性骨髓瘤相关检测制剂中的应用。

背景技术

多发性骨髓瘤（multiple myeloma, MM）属于B细胞恶性肿瘤，临床表现与多种因素有关，例如肿瘤压迫脊髓，细胞因子导致贫血，骨损伤引起疼痛，蛋白沉积肾脏导致肾损伤等。尿常规检测出现尿蛋白、红细胞、白细胞、管型，甚至出现慢性肾功能衰竭、高磷酸血症、高钙血症、高尿酸血症等，患者经常首诊于肾内科而贻误了治疗时间。因此寻找更为有效、无创的诊断指标有助于肿瘤的早期诊断和监测。

miRNA是一类小非编码单链RNA，约22个碱基长度。自1990年发现以来，已发现人类存在的miRNA约有2500种。miRNA参与了多种疾病的生理及病理过程，包括细胞分化、血管生成、凋亡、肿瘤发展、转移、药物抵抗等。识别miRNA表达改变具有重要价值，如果将miRNA的特定特征与正常生理病理状态相结合，可有望作为疾病早期标志物或疾病严重程度的生物标记物。

越来越多的研究证明miRNAs参与了MM的发生、发展，它们不仅可用于MM诊断，还可用于疾病分层、预后评估及疗效判断。人类miR-548基因家族成员目前已知有80个。miR58q在肾细胞癌过度表达，通过阻断ILT2，增强NK细胞介导的HLA-G依赖性细胞毒性，控制免疫效应细胞活性。此外，miR-548q在鼻咽癌诊断中发挥关键作用。本研究中结果显示miR-548q靶基因8个，分别参与MAPK、Ras、PI3K-Akt、Hippo 等信号通路，这些信号通路失调与癌症，包括MM的发生有关。

发明内容

本发明的目的在于提供一种尿液miR-548q在制备用于多发性骨髓瘤相关检测制剂中的应用。

优选地，所述尿液miR-548q的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示（ccgccauuacuuuugc）。

优选地，所述尿液miR-548q在多发性骨髓瘤患者中低表达。

优选地，所述制剂为多发性骨髓瘤患者尿液miR-548q检测试剂盒。

优选地，所述试剂盒包括反转录系统、扩增系统和定量内参标准化系统，其中，所述扩增系统由实时荧光定量PCR反应体系组成，所述实时荧光定量PCR反应体系包含能够与miR-548q反转录产物特异性结合的扩增引物、cDNA、RNase-free水和SYBR Green聚合酶链式反应体系。

优选地，所述反转录系统由反转录体系试剂组成，其中，所述反转录体系试剂包括逆转录酶缓冲液、逆转录引物、逆转录酶。

优选地，所述定量内参标准化系统由内参引物组成。