[发明专利]一种冠状病毒融合蛋白及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种冠状病毒融合蛋白，其特征在于，所述冠状病毒融合蛋白包括2019-nCoV S蛋白区段和2019-nCoV N 蛋白区段，所述2019-nCoV S蛋白区段如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列表达，2019-nCoV N 蛋白区段如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列表达；

所述冠状病毒融合蛋白如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

S1：重组包含2019-nCoV S蛋白区段的核苷酸序列和2019-nCoV N 蛋白区段核苷酸序列的全基因合成序列，将上述全基因合成序列构建至表达载体，获得重组质粒；

S2：将步骤S1中的重组质粒转化至宿主细胞，获得重组杆粒；

S3：将步骤S2中的重组杆粒转染细胞，进行表达；

S4：将步骤S3中表达得到的细胞培养物进行筛选、纯化，获得融合蛋白。

3.根据权利要求2所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中重组包含2019-nCoV S蛋白区段的核苷酸序列和2019-nCoV N 蛋白区段核苷酸序列的全基因合成序列时，采用柔性连接子将2019-nCoV S蛋白区段的核苷酸序列和2019-nCoV N蛋白区段的核苷酸序列连接。

4.根据权利要求3所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述柔性连接子如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列表达。

5.根据权利要求2所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述2019-nCoV S蛋白区段的核苷酸序列包括2019-nCoV S蛋白RBD结构域的核苷酸序列。

6.根据权利要求2所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的表达载体包括昆虫细胞表达载体和/或杆状病毒表达载体。

7.根据权利要求2所述的一种冠状病毒融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的宿主细胞包括大肠杆菌宿主和/或动物性细胞宿主。

8.根据权利要求1所述的一种冠状病毒融合蛋白在制备2019-nCoV 抗体检测试剂盒、疫苗、抗体或诊断抗原中的应用。