[发明专利]一种融合蛋白及其高效表达方法与应用在审
| 申请号： | 202010274125.9 | 申请日： | 2020-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN111378630A | 公开（公告）日： | 2020-07-07 |
| 发明（设计）人： | 薛飞燕;马兰青;杨明峰;姜梦嫣;黄丽娜;彭程 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/62;C12N15/70;C12P19/44 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 赵徐平 |
| 地址： | 102206 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 融合 蛋白 及其 高效 表达 方法 应用 | ||
1.一种融合蛋白，其特征在于，该融合蛋白为AtSUS1-RsUGT72B14融合蛋白，其基因编码序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的融合蛋白的高效表达方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)AtSUS1-RsUGT72B14融合蛋白基因的合成；
(2)AtSUS1-RsUGT72B14融合蛋白基因与表达载体连接，构建重组质粒；
(3)重组质粒转化至宿主大肠杆菌进行表达。
3.如权利要求2所述的融合蛋白的高效表达方法，其特征在于，所述步骤(2)为将AtSUS1-RsUGT72B14融合蛋白基因连接至大肠杆菌表达载体pET-28a，获得重组载体pET28a-AtSUS1-4a-RsUGT72B14。
4.如权利要求2所述的融合蛋白的高效表达方法，其特征在于，所述步骤(3)为测序验证测后，将重组质粒利用热激法转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，获得重组大肠杆菌E.coli/pET28a-AtSUS1-4a-RsUGT72B14进行表达。
5.如权利要求4所述的融合蛋白的高效表达方法，其特征在于，所述步骤(3)表达条件为：将重组大肠杆菌E.coli/pET28a-AtSUS1-4a-RsUGT72B14在LB液体培养基中培养至OD600为0.6～0.8，添加0.4～0.6mM诱导剂IPTG，在温度16～20℃下继续培养6～10h。
6.如权利要求1所述的融合蛋白在合成红景天苷中的应用。
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