[发明专利]蛋白复性试剂及其应用有效
| 申请号： | 202010278064.3 | 申请日： | 2020-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN111574583B | 公开（公告）日： | 2021-06-25 |
| 发明（设计）人： | 贡以捷;周晓玲;臧美翎;陆晨琳;王美玲;张春来 | 申请（专利权）人： | 上海海路生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/113 | 分类号： | C07K1/113 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 林青中 |
| 地址： | 200030 上海市徐*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蛋白 复性 试剂 及其 应用 | ||
1.蛋白复性试剂，其为由以下主要活性组分组成的组合物：
二硫代苏糖醇、精氨酸和组氨酸；
且所述主要活性组分在复性蛋白过程中的工作浓度在以下范围内：
-二硫代苏糖醇0.4mM～1.1mM；
-精氨酸2mmol/L～6mmol/L；
-组氨酸2mmol/L～6mmol/L；
所述蛋白复性试剂用于待复性蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的蛋白复性试剂，所述主要活性组分在复性蛋白过程中的工作浓度在以下范围内：
-二硫代苏糖醇0.5mM～1mM；
-精氨酸2.5mmol/L～5.5mmol/L；
-组氨酸2.5mmol/L～5.5mmol/L。
3.根据权利要求1或2所述的蛋白复性试剂，所述精氨酸为L-精氨酸，所述组氨酸为L-组氨酸。
4.根据权利要求1或2所述的蛋白复性试剂，所述试剂还包含TritonX-100，所述TritonX-100在复性蛋白过程中的工作浓度的体积百分比为0.15％～0.3％。
5.根据权利要求1或2所述的蛋白复性试剂，所述试剂包含还原型谷胱甘肽，但不包含氧化型谷胱甘肽。
6.复性蛋白的方法，包括：
将待复性蛋白与权利要求1～5任一项所述的蛋白复性试剂在液体环境下接触，并使得所述主要活性组分达到工作浓度；
所述待复性蛋白为GLP-1受体激动剂Fc融合蛋白，所述GLP-1受体激动剂为人胰高血糖素样肽-1类似物；
所述待复性蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
7.根据权利要求6所述的复性蛋白的方法，所述待复性蛋白以溶液的形式与所述蛋白复性试剂的溶液接触；
以待复性蛋白溶液与所述蛋白复性试剂的溶液的体积比为1:1计，所述待复性蛋白溶液的pH＝8.9～9.5。
8.根据权利要求7所述的复性蛋白的方法，以待复性蛋白溶液与所述蛋白复性试剂的溶液的体积比为1:1计，所述待复性蛋白溶液中待复性蛋白的浓度2mg/ml～3mg/ml。
9.根据权利要求6～8任一项所述的复性蛋白的方法，所述接触的时间为4hr～16hr。
10.试剂盒，其包含权利要求1～5任一项所述的蛋白复性试剂。
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