[发明专利]一种用于新冠病毒核酸体外扩增检测方法及其试剂盒在审
申请号: | 202010278080.2 | 申请日: | 2020-04-10 |
公开(公告)号: | CN111394518A | 公开(公告)日: | 2020-07-10 |
发明(设计)人: | 刘文涛;赖演媚 | 申请(专利权)人: | 成都因泰生命科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6848;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人: | 李蕊 |
地址: | 610000 四川省成都市中国(四川)自由*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 病毒 核酸 体外 扩增 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种用于新冠病毒核酸体外扩增检测的混合引物,其特征在于,所述混合引物包括如SEQ ID NO.1~6所示的引物。
2.一种用于新冠病毒核酸体外扩增的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测DNA;
(2)以待测DNA为模板,采用权利要求1所述引物进行逆转录NCA-QPCR即可。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述PCR反应体系共50μL,包括:SEQID NO.1~6所述的引物各0.2~0.4μmol/L、逆转录酶1~3U/50μL、Taq DNA聚合酶1~3U/50μL、dNTPs底物0.2~0.5mmol/L、模板RNA 1~5μL、Mg++1.5~3.5mmol/L、1~1.5×PCR缓冲液。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述PCR缓冲液包括50mmol/L KCl、10mmol/L Tris.HCl PH8.3、0.01%明胶,sybrgreen荧光染料。
5.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述PCR反应程序为:42℃逆转录5min;96℃,5min;96℃,退火20s;50℃,延伸10s;60℃,延伸30秒;共35个循环。
6.一种用于新冠病毒核酸体外扩增检测的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的混合引物。
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