[发明专利]一种微生物样品的快速检测方法及系统在审
申请号: | 202010281427.9 | 申请日: | 2020-04-10 |
公开(公告)号: | CN111455024A | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
发明(设计)人: | 夏涵 | 申请(专利权)人: | 西咸新区予果微码生物科技有限公司;予果生物科技(北京)有限公司;予果智造科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06;G16B30/10 |
代理公司: | 北京冠和权律师事务所 11399 | 代理人: | 张楠楠 |
地址: | 710000 陕西省西安市西咸新区*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 样品 快速 检测 方法 系统 | ||
本发明提供了一种微生物样品的快速检测方法及系统,所述方法包括:获取微生物样品;提取所述微生物样品中的核酸;采用病原微生物检测试剂盒构建测序文库;利用二代测序平台对所构建文库进行测序,获取核酸序列信息;根据所述核酸序列信息,获取所述微生物样品的检测结果,根据本发明的微生物样品的快速检测方法,不需要对微生物样品进行培养,只需对微生物样品进行提取处理后,对所提取的微生物样品中的核酸进行测序,获取核酸序列信息,根据核酸序列信息便可获取微生物样品的检测结果,大大缩短了检测所耗费的时间,从而实现了对微生物样品的快速检测。
技术领域
本发明涉及微生物检测技术领域,特别涉及一种微生物样品的快速检测方法及系统。
背景技术
随着社会的不断进步,使得对于工厂的排水、食品以及药品中的微生物的检测十分必要;目前对微生物的检测基本采用平板菌落计数法对微生物进行检测;
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。采用平板菌落计数法检测微生物检测需要耗费48-72小时,使得耗费较长的检测时间,并不能实现对微生物的快速检测。
因此,提出一种微生物样品的快速检测方法及系统。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种微生物样品的快速检测方法及系统,用以实现对微生物样品的快速检测。
本发明实施例中提供了一种微生物样品的快速检测方法,所述方法包括:
步骤1:获取微生物样品;
步骤2:提取所述微生物样品中的核酸;
步骤3:采用病原微生物检测试剂盒构建测序文库;
步骤4:利用二代测序平台对所构建文库进行测序,获取核酸序列信息;
步骤5:根据所述核酸序列信息,获取所述微生物样品的检测结果。
在一个实施例中,所述步骤2:提取所述微生物样品中的核酸,包括如下步骤:
将胺基引入目标对象中以对所述目标对象进行改性,所述目标对象包括薄膜装置、磁珠、环形谐振器或纳米颗粒中的至少一种;
将DTBP和经过所述裂解处理所述微生物样品所得到的核酸注入到经改性的所述目标对象上,以生成所述DTBP和所述核酸的复合物;
采用洗脱缓冲液处理所述DTBP和所述核酸的复合物,以提取所述微生物样品中的核酸。
在一个实施例中,所述步骤2:提取所述微生物样品中的核酸,包括如下步骤:
将所述微生物样品进行裂解处理,以释放所述微生物样品中的核酸,将所述微生物样品进行裂解处理,包括:机械法、反复冻融法、高温煮沸法、酶降解法、胍盐裂解法、碱裂解法、CTAB裂解法、酚裂解法中的一种或多种;
将经过所述裂解处理的所述微生物样品进行纯化处理,以去除所述微生物样品中的杂质,将经过所述裂解处理的所述微生物样品进行纯化处理,包括:有机溶剂-乙醇沉淀法、硅膜吸附法、磁珠法、阴离子交换法、核酸自动化提取法中的一种或多种。
在一个实施例中,所述步骤3中采用病原微生物检测试剂盒构建基因组DNA测序文库执行以下步骤:
获取病原微生物检测试剂盒,所述病原微生物检测试剂盒包括识别四个碱基的限制性内切酶混合液、Taq DNA聚合酶、T4 DNA连接酶、连接促进剂、dNTP、ATP、接头、高保真DNA聚合酶以及二硫苏糖醇;
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