[发明专利]一种缩短人源肿瘤异种移植PDX模型周期的方法在审
申请号: | 202010282580.3 | 申请日: | 2020-04-12 |
公开(公告)号: | CN111500541A | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
发明(设计)人: | 孙晓娇;齐慧;周丽涛;郝雅欣 | 申请(专利权)人: | 江苏安泰康健康科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;A01K67/027 |
代理公司: | 南京科知维创知识产权代理有限责任公司 32270 | 代理人: | 许益民 |
地址: | 225300 江苏省泰州市泰州医药*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 缩短 肿瘤 移植 pdx 模型 周期 方法 | ||
1.一种缩短人源肿瘤异种移植PDX模型周期的方法,其特征在于:所述方法包括:
步骤1:临床筛选,获取肿瘤标本或分离原代肿瘤细胞;
步骤2:取出肿瘤标本或细胞后立即转入含有RPMI-1640培养基的50ml离心管中,并将离心管置于冰上运送至动物中心;
步骤3:转移肿瘤标本或细胞至含有RPMI-1640培养基的100mm培养皿中,并将肿瘤标本或细胞分成两份,在培养皿上加盖放置于冰上保存待用;
步骤4:其中一份肿瘤标本或细胞中添加1×106 μL含有脊髓间充质干细胞的RPMI-1640培养基和20μL基质胶,混合均匀,室温下凝胶化10分钟,制得凝胶化混合物1;其中另一份瘤标本或细胞中20μL基质胶,混合均匀,室温下凝胶化10分钟,制得凝胶化混合物2;移植凝胶化混合物1至实验组裸小鼠右侧背部近腋部皮下,移植凝胶化混合物2至对照组裸小鼠右侧背部近腋部皮下;以及
步骤5:控制实验组和对照组的小鼠自然生长并观察,每周检测两组小鼠的各种指标,8周后对比两组小鼠体内的成瘤情况。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中筛选实体瘤肿瘤患者。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述脊髓间充质干细胞是来源人类的脊髓间充质干细胞。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,RPMI-1640培养基中含有1%抗生素,所述抗生素包括青霉素和链霉素。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤4中使用注射针注射至裸小鼠右侧背部近腋部皮下,其中,注射针为23号套管针。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤4中实验组和对照组分别包括8只4-6周龄裸小鼠。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤4中,使用脊髓间充质干细胞和基质胶处理所述肿瘤组织或者细胞前,所述肿瘤组织被切成小块,或者,提供培养稳定的10μL,0.5×106 肿瘤细胞。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤5中检测的小鼠指标包括小鼠的体重、小鼠的成瘤率、小鼠所成瘤的体积及小鼠最初成瘤的时间。
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