[发明专利]一种抗衰老的注射针剂及应用

权利要求书

1.一种抗衰老的注射针剂，包括弹性蛋白肽，其特征在于，还包括人脂肪间充质干细胞培养基上清和海藻提取物。

2.根据权利要求1所述的一种抗衰老的注射针剂，其特征在于，包括弹性蛋白肽的冻干粉与脂肪干细胞培养基上清混合，其中，脂肪干细胞培养基上清1000份，弹性蛋白肽0.04~0.06份、海藻提取物的浓度为19~21份、维生素A 49~51份、维生素C 8~10 份。

3.根据权利要求1或2所述的一种抗衰老的注射针剂，其特征在于，弹性蛋白肽的制备方法是：将弹性蛋白分散在去离子水中，调节pH值至 pH8.0，然后进行酶解；将酶解所得混合物在 55 ℃下振荡温浴 10 h，酶灭活后进行离心，随后，将收集的上清液冻干并储存在-18℃直至使用。

4.根据权利要求1或2所述的一种抗衰老的注射针剂，其特征在于，人脂肪间充质干细胞培养基上清的获取过程是：

1)将人体脂肪组织移入无菌大培养皿中，用无菌组织剪反复剪切至组织成糊状，移入离心管，加入等体积的0.075％的I型胶原酶，置于摇床上消化45min，得到消化后的脂肪颗粒；

2)消化后的脂肪颗粒加入等体积的含10％胎牛血清的间充质干细胞完全培养基终止消化，100目滤网过滤，滤液离心3min，弃上清后所得沉淀；

3)对步骤2）获得的沉淀用5mL间充质干细胞完全培养基重悬，细胞计数后稀释，以1×105／cm²的密度接种于培养皿中，置于37℃含5％CO₂的恒温培养箱中培养，48 h后首次换液去除未贴壁细胞，此后每72h换液一次；

4)待细胞长至80％--90％融合时PBS漂洗两次，0.25％胰酶1mL，培养箱孵育2-3min，低倍镜下观察细胞缩小变圆，细胞脱壁后加入等体积完培终止消化，得到细胞悬液；

5)对步骤4）得到的细胞悬液离心3min后弃上清，以间充质干细胞完全培养基重悬后1：3传代，同法传代培养至P2代；采用无血清培养基第三代培养48小时后离心获取上清，保存于4度环境中待用。

5.根据权利要求4所述的一种抗衰老的注射针剂，其特征在于，所述的无血清培养基配方如下：按照重量份数，包含：a-MEM基础培养基1.5×104份、人血白蛋白4份、腺苷17份、胞苷15份、鸟苷15份、尿苷15份、2-脱氧腺苷16份、2′-脱氧胞苷盐酸16份、2-脱氧鸟苷16份、胸腺嘧啶15份、氢化可的松15份、维生素C 15份、碱性成纤维细胞生长因子0.03份、表皮生长因子0.02份、TGF-β0.03份、促红素0.02份和0.01份褪黑素。

6.如权利要求1~5中任一所述抗衰老的注射针剂在受伤后皮肤修复方向的应用。