[发明专利]一种诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法

说明书

本发明属于植物的繁殖技术领域，具体涉及一种诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法。本申请的诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法，通过以牛尾菜花柄为材料，通过适宜浓度的甲基磺酸乙酯浸泡一定时间，再结合植物组织培养技术，通过采用花柄组织不定芽诱导、不定芽生根复壮等方法，获得各单株独立性强、单株遗传信息纯度高、单株来源清晰等特征的新型的牛尾菜人工栽培品种，该品种遗传稳定，可作为品系栽培和构建牛尾菜突变体库。

技术领域

本发明属于植物新品种技术领域，具体涉及一种诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法。

背景技术

牛尾菜(Smilax riparia A.DC.)是百合科菝葜属多年生草质藤本植物。别名：鞭鞘子菜、草菝葜、鞭杆菜、千层塔、龙须菜，茎长1-2米，中空，有少量髓，干后凹瘪并具槽。叶比上种厚，形状变化较大；叶柄长7-20毫米，通常在中部以下有卷须。伞形花序总花梗较纤细，长3-5(-10)厘米。主要分布于中国东北、朝鲜和日本等地区，生长于海拔1600米以下的林下、灌丛、山沟或山坡草丛中。牛尾菜是一种集食用、药用和工业用为一体的野生资源植物，具有重要的经济价值。牛尾菜的根状茎具有甘、苦、平的特性，具有祛痰、止咳、通络止痛、活血化瘀之功效，可用于腰腿筋骨疼痛，跌打损伤；主治风湿性关节炎、筋骨疼痛、腰肌劳损等，也是东北地区多种植物资源中值得进一步筛选的抗癌植物种类之一。牛尾菜作为工业原料，利用其种子可提取油料，其根茎还富含鞣质，可提取栲胶，这些都是工业上的重要原材料。牛尾菜可以作为野菜食用，是人们喜食的野菜珍品，其营养价值高，且纤维柔软可口，茎口味清香，其嫩茎叶中总氨基酸含量为215.95毫克/克，远远超过一般蔬菜，甚至高于名贵的山野菜白芦笋、蕨菜等，在17种氨基酸中有7种人体必需的氨基酸，占总氨基酸含量的32.65％；嫩茎叶中还含有丰富的钙、锌、铁、维生素类及含氮物质，特别是B族维生素，堪称维生素含量特高的野菜。

目前，作为食材和药用的牛尾菜来源于野生资源，由于过度采挖，野生资源濒临灭绝。吉林和辽宁部分地区已对牛尾菜进行人工驯化和栽培生产，仍在小范围摸索阶段，尚未实现大面积人工栽培。人工栽培生产过程中产量较低，亩产不足500斤，出现萌芽力差、茎干细弱、易老化、植株退化严重、产量低和抗性差等问题，且地下根茎有腐烂，并趋于严重的现象。

在现有技术中，对牛尾菜的研究大多集中于种子苗人工繁育、驯化和栽培生产技术及病虫害防治等方面，未发现进行品种改良和新品种(系)培育的相关报道，而且因其市场供不应求严重和野生种栽培问题之间存在的矛盾性问题。因此，急需栽培出性状优良、遗传稳定且抗性强的牛尾菜新品种(系)，并应用于人工规模化生产栽培。

发明内容

为了解决上述牛尾菜野生资源濒临灭绝，人工栽培产量较低，易出现萌芽力差、茎干细弱、易老化、植株退化严重、产量低、抗性差等问题，本发明提供一种诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种诱导牛尾菜花柄组织突变的新品种培育方法，包括以下步骤：

(1)材料选择与预处理：6月中下旬，待野生牛尾菜伞形花序放开后选取总花柄，切取3.0cm长度；接着用75％乙醇涮洗10s后移至饱和次氯酸钠溶液浸泡3min，无菌水冲洗8次，并用无菌滤纸吸干表面水分；接着在超净工作台内，将消毒灭菌后的花柄纵向切开，切割成1.0cm的小段形成花柄组织，将花柄组织分批放入不同浓度的EMS溶液中，浸泡20-60min；最后用无菌水冲花柄组织15次，以备接种；

(2)花柄组织不定芽的诱导培养：将步骤(1)中经过EMS浸泡后的花柄组织转接到花柄组织不定芽诱导培养基中，并置于光照周期8h·d^-1、光照强度900lx和温度28±2℃条件下培养72天，花柄组织上部茎皮上产生独立、可分离的不定芽，并继续培养20天，不定芽长至0.8cm；