[发明专利]一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒及其制备和应用

权利要求书

1.一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，包括：鼠得克检测酶标板、鼠得克系列标准品工作液、鼠得克抗体工作液、酶标记物工作液、样品稀释液、样品提取液、洗涤液、底物显色液、终止液组成，其特征在于：所述鼠得克检测酶标板由式I鼠得克药物半抗原与载体蛋白的偶联物包被制成，所述鼠得克抗体为鼠得克药物的特异性抗体。

2.根据权利要求1所述的一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述鼠得克药物半抗原的制备方法包括如下步骤：称取鼠得克100mg用10ml甲醇溶解，加入30mg氢化钠，36mg四溴丁酸室温反应，TLC检测反应完全后向体系中加入饱和食盐水50ml，经过滤、洗涤、干燥即得式I化合物。

3.根据权利要求1所述的一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述鼠得克药物的特异性抗体为鼠得克单克隆抗体，所述鼠得克单克隆抗体由重链和轻链组成，所述重链的可变区的氨基酸序列如序列表的序列1所示，所述轻链的可变区的氨基酸序列如序列表的序列2所示。

4.根据权利要求1或3所述的一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述鼠得克抗体工作液为将鼠得克的单克隆抗体用抗体稀释液稀释1000倍，获得含有鼠得克药物的单克隆抗体的抗体工作液；

所述抗体稀释液为含有Proclin 300、Triton X-100的PBS缓冲液；所述抗体稀释液的溶剂为去离子水，溶质为无水磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、氯化钠、氯化钾、Proclin300和Triton X-100，所述溶质在所述PBS缓冲液中的浓度分别为1.072g/L、0.59g/L、8.5g/L、0.4g/L、200μL/L和500μL/L。

5.根据权利要求1所述的一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述酶标记物工作液为将辣根过氧化物酶标记的抗鼠得克药物单克隆抗体的抗抗体用抗抗体稀释液稀释500倍获得的；

所述抗抗体稀释液为含有小牛血清、Proclin 300的PBS缓冲液；所述抗体稀释液的溶剂为去离子水，溶质为无水磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、氯化钠、氯化钾、小牛血清和Proclin 300，所述溶质在所述PBS缓冲液中的浓度分别为1.072g/L、0.6g/L、16g/L、0.4g/L、50mL/L和200μL/L。

6.根据权利要求1所述的一种检测香豆素与茚满二酮类杀鼠剂的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述鼠得克系列标准品工作液为6种鼠得克标准品工作液，所述标准品工作液的溶剂为含有光稳定剂、牛血清白蛋白的PBS缓冲液，溶质为鼠得克；所述溶质在所述6种鼠得克标准品工作液中的浓度分别为0μg/L、0.15μg/L，0.45μg/L、1.35μg/L、4.05μg/L、12.15μg/L；所述PBS缓冲液的溶剂为去离子水，溶质为十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾、光稳定剂和牛血清白蛋白，所述溶质在所述PBS缓冲液中的浓度分别为2.68g/L、0.1g/L、4g/L、0.1g/L、0.2g/L和0.1g/L，pH值为7.2。