[发明专利]一种基于实时荧光定量PCR的检测CYP2C19基因分型的方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 202010287976.7 | 申请日： | 2020-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN111607643A | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 周其好;严广号;孙永祥;宋东亮;李剑辉 | 申请（专利权）人： | 武汉翌圣生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 | 代理人： | 刘洁瑜 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号光谷国际生*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 实时 荧光 定量 pcr 检测 cyp2c19 基因 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种非疾病治疗和诊断目的的基于实时荧光定量PCR的检测CYP2C19基因分型的方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；
第二步，检测扩增产物的荧光信号；
第三步，以检测结果判定样品中是否含有CYP2C19*2基因型；
其中，用于PCR扩增的反应体系中含有用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对和用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针，
所述用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO：1和SEQ IDNO：2所示；用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。
2.如权利要求1所述的非疾病治疗和诊断目的的基于实时荧光定量PCR的检测CYP2C19基因分型的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件如下：
反应体系为20μL：2×HieffTM qPCR TaqMan Probe Master Mix，10μL；引物各10μM，0.4μL；探针10μM，0.2μL；人基因组10ng；余量为无菌超纯水；
PCR反应条件：预变性，95℃，1min，1个循环；变性，95℃，10s；退火、延伸60℃，30s；40个循环。
3.一种用于检测CYP2C19基因分型的引物对及荧光探针，其特征在于，包括用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对和用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针，
所述用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO：1和SEQ IDNO：2所示；用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。
4.一种用于检测CYP2C19基因分型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3所述的用于检测CYP2C19基因分型的引物对及荧光探针。
5.一种权利要求4所述的用于检测CYP2C19基因分型的试剂盒在用于非疾病治疗和诊断目的的检测CYP2C19基因分型中的应用。
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