[发明专利]一种排除巨酶分子对血清酶浓度检测带来干扰的方法

权利要求书

1.一种排除巨酶分子对血清酶浓度检测带来干扰的方法，其特征在于，所述排除巨酶分子对血清酶浓度检测带来干扰的具体步骤如下：

步骤一：CowanI细菌准备；

(A1)、为使CowanI细菌菌体表面的SpA分子更为稳定，首先利用2％福尔马林溶液进行固定，固定时间和条件为室温固定2小时；

(A2)、将固定好的金葡菌放置在80℃水浴中进行灭活，由于SpA蛋白对热非常稳定，不会干扰SpA的结合活性，同时，灭活后的细菌可以长期保存；

(A3)、采用含有0.5％tween20的PBS溶液进行洗涤，可以去除菌体表面非共价结合的SpA蛋白，提高反应的特异性；

步骤二：血清吸附试验；

(B1)、抽取怀疑含有巨酶的患者空腹静脉血5ml，待血清自凝后离心，分离血清；

(B2)、将步骤一中的CowanI菌液混匀，与血清按照1：1的比例进行混匀，置于37℃摇床孵育3小时，使菌体表面的SpA蛋白与免疫球蛋白Fc段充分结合成免疫复合物；

(B3)、通过高速离心的方式对免疫复合物进行分离，吸取上层分离血清进行酶浓度检测；

步骤三：吸附前后血清酶浓度检测和结果计算；

(C1)、通过标准方法检测血清吸附前后的酶浓度；

(C2)、吸附后酶浓度校正：在酶和免疫球蛋白检测时，将吸附后检测到的浓度水平乘以稀释倍数，得到的数值与原始浓度的比值，即为回收率，相应的吸附率计算方式为：100％-回收率；

(C3)、比较吸附前后血清酶的水平，以及回收率和吸附率，判断是否2存在巨酶干扰现象；如吸附后酶水平处于正常参考区间，可以判断存在巨酶干扰，对检测报告进行结果更正；

所述方法适用于排除巨天冬氨酸酰基转移酶、巨肌酸激酶、巨淀粉酶和巨碱性磷酸酶造成的干扰。

2.根据权利要求1所述的一种排除巨酶分子对血清酶浓度检测带来干扰的方法，其特征在于，所利用的CowanI菌株是高表达膜表面SpA的金黄色葡萄球菌。

3.根据权利要求1所述的一种排除巨酶分子对血清酶浓度检测带来干扰的方法，其特征在于，对CowanI金黄色葡萄球菌进行处理时，首先利用2％福尔马林溶液先行细胞固定；然后经洗涤后用80℃的水浴5分钟进行灭活。