[发明专利]一种分泌结核分枝杆菌ESAT6蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞株、其抗体及应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种分泌抗早期分泌抗原靶6（ESAT6）单克隆抗体的杂交瘤细胞株8G4、单克隆抗体MAb 8G4及其应用。所述结核分枝杆菌ESAT6单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO:C2019287的杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生。该单克隆抗体MAb 8G4具有效价高、特异性好的优势，基于此建立的竞争ELISA检测试剂盒方法具有良好的灵敏度和特异性，可同时检测针对多种宿主的结核分枝杆菌复合群感染引起的结核病，操作简便，具有应用于结核病检测的价值。

技术领域

本发明涉及一种生物技术领域，特别是涉及一种分泌结核分枝杆菌ESAT6蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞株、其抗体及应用。

背景技术

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)感染引起的一种慢性、消耗性传染疾病，同时也是一种可以引起动物和人类共同感染的人兽共患疾病。结核分枝杆菌复合群主要包括：结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、田鼠分枝杆菌(M.microti)等，其中结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)是重要人类病原体，可引起结核病；麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)引起麻风病；鸟分枝杆菌(M.avium)和其他非典型分枝杆菌经常感染艾滋病人，是免疫抑制病人的致病菌；牛分枝杆菌则是令人类和家畜感染结核病的主要源头，其不仅可以使牛患病，也可以让人患结核病。近年来，世界范围内艾滋病的流行及其耐药性的日益严重，结核病流行趋势又有所回升。结核病仍是一个全球性的需要高度重视的公共卫生和社会问题。

结核分枝杆菌早期分泌性6kDa靶抗原(ESAT6)是从结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白中分离出的一种小分子量蛋白，仅存在于牛分枝杆菌和结核分枝杆菌中，在所有BCG菌株中均缺失，是与结核分枝杆菌毒力和致病力相关的一种分泌性蛋白。ESAT6蛋白可刺激机体产生强烈的T细胞免疫应答并释放高水平的IFN-γ，是结核分枝杆菌感染早期阶段宿主细胞识别的主要靶抗原，可影响宿主的信号通路作用。鉴于以上特性，ESAT6蛋白已经成为结核病预防与控制研究的热点，有望发展成为结核病预防和诊断的最佳候选疫苗和特异性试剂。

结核菌素皮肤试验(TST)是目前检测结核分枝杆菌感染的主要手段，但是这种方法缺乏一定的特异性，易受到其他分枝杆菌抗原间交叉反应的影响，还会受到BCG接种的影响而使得检测结果呈现假阳性。结核分枝杆菌特异性抗原介导的IFN-γ释放试验具有较高的特异性，但此方法特异性的高低与所选用的刺激原即结核分枝杆菌相关抗原有关，且检测结果存在一定的假阳性，检测的准确性不强。

现有方法的缺陷及不足，以及各种免疫学检测诊断方法的建立和应用，都需要应用到高特异性、高亲和力的单克隆抗体。因此，ESAT6的研究及其抗体的研制具有较高的价值。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种分泌ESAT6单克隆抗体的杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体，以及该杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体在免疫检测领域的应用。

所述杂交瘤细胞株分泌的抗ESAT6的单克隆抗体效价高，其试剂盒可单独用于结核病检测，也可以作为一种补充检测方法与其它方法联合使用，1小时内即可获得检测结果，用于多种宿主结核病的检测。

本发明第一方面提供了一种分泌ESAT6单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞8G4或其传代细胞株，所述杂交瘤细胞株8G4保藏号为CCTCC NO:C2019287。

本发明第二方面提供一种ESAT6单克隆抗体8G4，其由上述杂交瘤细胞株或其传代细胞株产生。