[发明专利]一种Odorrana livida青蛙宿主防御肽livisin及其基因和应用

说明书

本发明公开了一种Odorrana livida青蛙宿主防御肽livisin及其基因和应用，该宿主防御肽属于Bowman–Birk蛋白酶抑制剂，命名为livisin。由17个氨基酸组成的多肽，分子量为1935.3道尔顿。编码livisin前体的基因OLTI(GenBank:LT591895.1)由300个核苷酸序列组成，其中133‑183个核苷酸序列为livisin成熟肽的编码基因，进一步翻译后修饰得到成熟肽livisin。本发明提供了一种天然宿主防御肽livisin在皮肤创伤修复中的应用，发现本肽能够通过增加血管生成来促进伤口的愈合，其效果明显优于现有技术的药物，伤口修复快，且不留瘢痕，促进创伤修复效果更明显。

技术领域

本发明涉及一种从Odorrana livida青蛙分泌物中鉴定的天然livisin以及其在创伤修复中的应用，属于生物医学技术领域。

背景技术

皮肤是是人体最大的器官，也是抵御外界环境的重要屏障，当皮肤受损时必须尽快得到有效的修复。皮肤伤口的愈合是一个精密而复杂的过程，需要多种细胞和组织的协调配合，如果愈合过程异常将会导致慢性伤口的产生，慢性伤口的治疗和管理将会消耗大量的费用和资源，因此寻找到能够有效调控伤口愈合过程、影响相关细胞活动的活性成分并阐明其作用机制，对发现促进皮肤创伤修复剂有重要的科学意义，也能为皮肤损伤修复提供新的治疗策略和选择。

宿主防御肽(HDPS，host defense peptides)是一种由10-60个氨基酸组成的分子量在1-6KDa左右的大分子物质，广泛存在于昆虫、植物、动物中，是大多数生物先天免疫的重要组成部分。HDPS有广泛的抗菌、抗癌、抗病毒、抗寄生虫等生理活性，在动物和人类医学、营养学、饲料(食品)学和免疫学等领域有着广阔的开发应用前景。两栖动物多生活在潮湿的环境中，它们在漫长的进化过程中进化出复杂的皮肤分泌物，帮助它们抵御捕食者和病原体的侵害，在现有的宿主防御肽数据库中三分之一以上来自两栖动物。两栖动物有很强的伤口愈合和肢体再生能力，据报道，从两栖动物皮肤分泌物的提取到的宿主防御肽有部分能促进皮肤伤口愈合，如Tylotoin、CW491、Esculentin-1a(1-21)NH21、AH901等。

发明内容

本发明提供一种Odorrana livida青蛙宿主防御肽livisin及其基因和应用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：Odorrana livida青蛙宿主防御肽livisin，其特征在于：该多肽是由前体基因OLTI编码的一条由17个氨基酸组成的多肽，6-16位形成一个分子内二硫键，分子量为1935.3道尔顿。多肽全序列一级结构(氨基酸序列如SEQ ID NO.1)为：

Gly Phe Leu Arg Gly Cys Trp Thr Lys Ser Phe Pro Pro Lys Pro CysLeu15*1015**表示形成分子内二硫键的位置；

基因测序结果表明编码livisin的前体基因OLTI由300个核苷酸(SEQ IDNO:2)组成(GenBank Accession Number:LT591895.1)，自5’端至3’端序列为:

其中第133-183位核苷酸为编码宿主防御肽livisin的编码基因。

本发明的Odorrana livida青蛙宿主防御肽livisin在制备促皮肤创伤修复治疗药物的应用。

本发明具有以下有益效果：提供一种新的天然的具有促进皮肤伤口愈合的宿主防御肽livisin，该宿主防御肽属于Bowman–Birk蛋白酶抑制剂，命名为livisin，本发明对皮肤损伤有明显的促进愈合作用，且没有细胞毒性和溶血性，能直接涂覆在伤口处或注射至体内，具有促进表皮闭合、促进血管生成和促进伤口愈合等活性，其效果明显优于现有技术的药物，伤口修复快，且不留疤痕。

附图说明