[发明专利]评估肝内胆管癌预后的分子标志物、试剂盒及方法

说明书

本发明公开了一种评估肝内胆管癌预后的分子标志物、试剂盒及方法。评估肝内胆管癌预后的分子标志物为肝内胆管癌组织中的ALKBH5蛋白，该蛋白的表达量与肝内胆管癌的预后良好成正相关。评估肝内胆管癌预后的试剂盒含有ALKBH5蛋白表达量的检测相关试剂。评估肝内胆管癌预后的方法包括以下步骤：1)检测肝内胆管癌组织切片中ALKBH5蛋白的表达量；2)与预先设定的ALKBH5蛋白表达量阈值做比较，高于阈值评定为患者预后良好，否则评定为患者预后不佳。

技术领域

本发明属于医学生物检测技术领域，具体涉及一种评估肝内胆管癌预后的分子标志物、试剂盒及方法。

背景技术

肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC)是一种高度恶性的胆管癌亚型，起源于肝内胆管上皮，是发病率仅次于肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的肝脏原发恶性肿瘤，约占肝脏原发恶性肿瘤的10-15％，近年来发病率和致死率均呈上升趋势。临床上，手术切除是早期肝内胆管癌的唯一治疗方法。但是由于肝内胆管癌症状十分隐匿，发现时多已晚期，错过手术的最佳时期。并且由于手术切除复发率极高(术后第一年发病率50％)，患者预后很差。晚期或不可手术切除的胆管癌患者，标准化疗方案仅限于吉西他滨和顺铂，且效果有限，总的中位生存率小于1年，目前尚无已批准的二线治疗药物，缺乏有效治疗手。近年来，肝内胆管癌中分子靶向治疗药物(靶向酪氨酸激酶等)的临床试验没有取得理想的结果，寻找新的治疗方法以延长患者生存时间是一个亟待解决的科学难题。

在生理状态下，RNA m6A甲基化修饰已被证明在组织发育与干细胞自我更新和分化、昼夜节律调节、调节T细胞稳态等很多正常生物过程中发挥关键作用。RNA m6A甲基化修饰异常在癌症的发生发展中也扮演了重要角色。RNA m6A甲基化修饰在ICC或胆管癌中的作用尚无报道。

ALKBH5(alkB homolog 5)是第二个发现的重要的m6A去甲基化酶。已有ALKBH5参与癌症调控的报道：ALKBH5通过维持Foxm1表达和细胞增殖程序来维持胶质母细胞瘤干细胞的致瘤性；通过减少长链非编码RNA Kcnk15-As1甲基化来抑制胰腺癌的转移；通过促进Nanog mRNA的m6A去甲基化增强缺氧诱导的乳腺癌干细胞表型。然而，ALKBH5在肝内胆管癌中的作用尚未阐明，ALKBH5与肝内胆管癌患者预后的关系也没有相关研究报道。

发明内容

针对肝内胆管癌复发率高的问题，本发明旨在提供一种评估肝内胆管癌预后的分子标志物，该分子标志物也是ALKBH5的一种新的应用。

本发明人经过广泛而深入的研究，首次发现采用免疫组化方法检测ALKBH5蛋白在人肝内胆管癌组织中的表达量，能够判断肝内胆管癌患者预后。

本发明的第一方面，提供了一种评估肝内胆管癌预后的分子标志物，所述分子标志物为ALKBH5蛋白。

进一步，所述分子标志物为肝内胆管癌组织中的ALKBH5蛋白，该蛋白的表达量与肝内胆管癌的预后良好成正相关。

优选地，所述预后包括检测、疗效评估、复发监控。

本发明第二方面，提供了所述评估肝内胆管癌预后的分子标志物在制备评估肝内胆管癌预后的试剂或试剂盒中的应用。

优选地，所述试剂或试剂盒采用免疫组化方法检测ALKBH5蛋白在肝内胆管癌组织中的表达量。

进一步，本发明提供了一种评估肝内胆管癌预后的试剂盒，所述试剂盒包括ALKBH5蛋白表达量的检测相关试剂。

优选地，所述评估肝内胆管癌预后的试剂盒包括ALKBH5的单克隆抗体或多克隆抗体。

可选地，所述ALKBH5多克隆抗体为SIGMA公司的产品，货号为HPA007196。

优选地，所述评估肝内胆管癌预后的试剂盒包括免疫组化试剂。